湖南野生假俭草组织培养再生体系的研究

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本试验以湖南野生假俭草(Eremochloa ophiuroides)的茎段为外植体,研究假俭草茎段丛生芽和愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、无菌苗的生根以及炼苗移栽过程中,不同消毒处理、不同基本培养基、不同激素浓度及配比等条件对假俭草组织培养再生体系建立的影响,找出了适宜假俭草快速繁殖及再生体系建立的最优条件。研究结果表明:1.外植体消毒:选择生长活跃期的幼嫩茎段为外植体,在经过预处理后,用75%酒精消毒45 s,再结合加有约0.1% Tween-80的0.1%升汞消毒10min,褐化率与污染率较低,分别为12.5%、6.3%,成活率较高,达81.3%。2.丛生芽的诱导与增殖:诱导茎段产生丛生芽的最适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.4 mg/L。在此培养基下,丛生芽诱导率达90.0%,新芽粗状叶大,生长旺盛;在丛生芽的增殖培养中,添加1.0 mg/L 6-BA与0.2 mg/L IBA的MS培养基增殖效果最佳。在此浓度配比下,芽苗生长健壮,植株增殖生长快,叶片绿色,增殖系数达到3.13。3.愈伤组织诱导与继代:暗培养条件下,在MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA0.4 mg/L愈伤组织培养基上,愈伤组织诱导率高,达到64.6%。在此培养基上继代增殖,愈伤组织生长快,淡黄色,结构致密,容易分化,不出现纤毛结构。4.愈伤组织分化:诱导假俭草愈伤组织芽的分化时,采用MS+NAA 0.08 mg/L+6-BA 0.8 mg/L+CH 500 mg/L+蔗糖35g/L,愈伤组织的分化率达95.0%。5.根的诱导:诱导生根的最佳培养基是1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.5 mg/L,此培养基上生根率达到100%,根生长健壮。6.炼苗移栽:选取健壮幼苗移栽,并经驯化炼苗15天后,移栽到温室大棚土壤中,移栽成活率达80%。
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