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肌内脂肪在肉品质的形成中具有重要作用,本课题探讨影响肌内脂肪沉积的生理生化因素及对畜禽肌内脂肪进行选择育种的辅助分子标记。首先研究运动训练、高脂饲料及大豆多肽对肌内脂肪形成的影响,并运用DDRT-PCR技术分析影响肌内脂肪沉积的骨骼肌基因表达差异,再运用SSCP技术研究对机体能量物质代谢有调节作用的AMPK基因的多态性与肌内脂肪等性状的相关性,结果表明:(1)长期高脂饲料喂养使大鼠体重低于对照组,而肝脏及骨骼肌内脂肪显著增加(P<0.01),经运动训练或补充大豆多肽后,这一症状得以改善;(2)日本大耳免体重、全净膛重、肌内脂肪含量明显高于野兔(P<0.05);(3)在运动与非运动组大鼠骨骼肌内存在Ldh-A、PDE两基因表达差异,即中等强度游泳运动组,两基因都有明显表达,而非运动组其表达量显著下降;(4)在日本大耳兔和野兔骨骼肌中也存在MGF、Ch25h两基因表达差异;(5)日本大耳兔群体中,编码AMPKα1亚基的PRKAA1基因在8731处有一T插入突变,突变基因型与兔肌内脂肪含量呈显著相关;(6)日本大耳兔群体中,编码AMPKγ1亚基的PPKAG1基因存在1531处C碱基插入突变,但各基因型间不存在体重、全净堂重、肌内脂肪含量等差异;(7)在日本大耳兔与野兔两群体间,编码AMPKα2亚基的PRKAA2基因经SSCP检测两者间无基因型差异,但经测序分析得1754处有A→G突变,且两群体存在活体重、全净堂重、肌内脂肪含量等生产性能的显著性差异;(8)分析编码SD大鼠AMPKα2、γ2亚基的PRKAA2、PRKAG2基因多态性得,在PRKAA2基因1944处有一G→A突变,经序列分析得这一突变为同义突变,而PRKAG2基因3429处有一A插入突变,在编码序列中形成一终止密码子,使编码蛋白残基变为1143个氨基酸残基,经统计分析得大鼠群体的两处突变与肌内脂肪、体重都不相关。通过实验我们得:(1)饲料成分(如脂肪含量、饲料添加剂)、饲养方式等环境因素可影响畜禽体内能量及物质代谢,因此饲养方式改进对改善肉品质是有益的,但不当的饲养方式对育种则带来不利因素;(2)通过DDRT-PCR研究可预测Ldh-A、PDE、MGF、Ch25h等基因的多态性可作为肉用动物瘦肉率、日增重、低胆固醇等生产性能选择辅助标记;(3)作为机体重要的调节脂肪、糖、蛋白质代谢的因子,AMPKα1亚基SNPs可作为肌内脂肪选择育种的QTL。