多孔钛表面氯己定接枝量对生物学性能影响的研究

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牙种植是口腔最常见的用于治疗牙列缺损或者牙列缺失的方案之一,纯钛及钛合金由于其良好的生物学性能和理想的力学性能而成为目前应用最广、最受青睐的种植体金属材料。种植材料的多孔结构可以模拟骨结构促进成骨细胞黏附,但同时细菌也容易在多孔结构表面聚集并形成生物膜,导致种植体周围感染,甚至种植失败。因此,对种植体表面进行抗菌修饰并促进骨整合具有重要临床意义。方法:本研究针对种植早期的感染和骨整合不良,采用碱热处理在钛表面构建微/纳米多孔结构,然后利用氨基硅烷和戊二醛将氯己定共价接枝在材料表面,并通过调整反应体系中氯己定(CHX)的浓度(0.1,0.5,1.0 mg/m L),构建出具有不同氯己定接枝量的抗菌多孔钛表面。通过扫描电镜(SEM),X射线光电子能谱(XPS),水接触角和氯己定定量等方法分析抗菌肽负载表面是否构建成功;通过活/死细菌染色(Live/Dead)、细菌涂板计数、抑菌环、结晶紫染色等手段评价构建表面对抗种植体植入初期表面最主要的致病菌:金黄色葡萄球菌的抗菌能力大小;通过MTT和荧光染色评价构建表面对成骨前体细胞的细胞相容性;最后,通过细菌-细胞竞争粘附实验模拟种植体植入过程,评价在有菌环境中材料抗菌性对细胞正常黏附的重要性。结果:结果表明氯己定接枝后多孔钛结构中孔洞尺寸减小,反应体系中氯己定浓度不但与材料表面氯己定接枝量呈正相关且影响接枝氯己定的构象,随着接枝量增加,表面亲水性较硅烷化表面有显著改善,间接证明氯己定接枝成功。同时,高浓度氯己定较低浓度氯己定发生明显构象改变,减少了表面胍基的暴露,可显著提高生物相容性。抗菌结果显示氯己定接枝表面不仅抑制细菌在材料表面的定植,杀灭粘附的细菌,还可以抑制材料周围细菌的增殖;涂层的抗菌能力随氯己定接枝量增加而增加,氯己定接枝量为3.98±0.31μg时(反应溶液浓度为1mg/m L),材料表面细菌数量最少,死细菌比例最高,具有最好的抗菌能力。细胞相容性评价结果证明,氯己定接枝后并未导致明显的细胞毒性且随着CHX浓度增加,细胞毒性减弱;细菌-细胞竞争粘附评价结果显示氯己定修饰表面在细菌、细胞两者竞争的过程中为细胞的粘附提供了保障。结论:以上结果说明将口腔常用的杀菌消毒药物-氯己定(洗必泰)用于种植体表面修饰同样可以有效抑制种植体表面细菌污染,通过戊二醛以及硅烷偶联作用在多孔钛表面接枝CHX是一种简单、环境友好的表面改性方法,修饰后的表面不但具有高的氯己定利用率,而且在赋予种植体表面良好抗菌性的同时未对钛本身良好的细胞相容性产生影响,故该涂层技术在牙科钛种植体和钛类骨修复材料表面的改性中具有潜在的应用价值。
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