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目的:通过过表达AKAP121来在线粒体部分富集PKA诱导神经保护性线粒体重塑,检测线粒体抗氧化指标的变化,并探究AKAP12A/PKA诱导的线粒体重塑对小鼠海马细胞系HT22-谷氨酸氧化应激模型的保护作用,同时,在通过反复暴露于高浓度谷氨酸中诱导的HT22-R谷氨酸抵抗的细胞中,研究AKAP121/PKA以及线粒体抗氧化指标的变化。方法:HT22细胞转染AKAP121,S-AKAP84,OMM-PKA,Drp1-656D后,与对照组同时加入4m M浓度谷氨酸孵育,CCK8观察细胞活力变化。HT22细胞转染AKAP121,S-AKAP84,OMM-PKA,Drp1-656D后,在正常情况下,检测相应线粒体抗氧化指标SOD2与GSH的变化,并用免疫荧光显微镜得到线粒体融合度与线粒体含量的变化。结果:1.不同谷氨酸浓度孵育24h,HT22细胞的细胞活力变化。谷氨酸浓度为4m M时,孵育24h,HT22细胞活力为对照组的25%(P<0.05)。4m M浓度谷氨酸毒性下AKAP121有显著的保护作用(P<0.001)。2.OMM-GFP,S-AKAP84,OMM-PKA定位在线粒体外膜。OMM-PKA组的p-Drp1/Drp1比值显著高于OMM-GFP对照组(P<0.001)。S-AKAP84,OMM-PKA转染组HT22细胞的线粒体融合程度显著高于OMM-GFP对照组(P<0.001)。S-AKAP84(P<0.001),OMM-PKA(P<0.01)转染组HT22细胞的线粒体含量显著高于OMM-GFP对照组。3.过表达OMM-PKA的HT22细胞的线粒体部分的PKAc与SOD2显著高于对照组(P<0.001)。4m M谷氨酸孵育24h显著减低了HT22细胞内总GSH与ATP的含量(P<0.001)。正常培养条件下,AKAP121转染组胞内总GSH含量显著高于对照组(P<0.01)。AKAP121转染组4m M谷氨酸孵育8h,线粒体部分超氧阴离子水平显著低于对照组(P<0.001)。4.Drp1-S656D-GFP转染组HT22细胞的线粒体融合程度显著高于OMM-GFP对照组(P<0.05)。4m M浓度谷氨酸毒性下,Drp1-S656D-GFP有显著的保护作用(P<0.001)。Drp1-S656D-GFP转染组HT22细胞的线粒体含量显著高于OMM-GFP对照组(P<0.001)。5.HT22-R组的p-CREB/CREB显著高于HT22-S对照组(P<0.01),HT22-R组的AKAP121显著高于HT22-S对照组(P<0.001)。HT22-R组的SOD2显著高于HT22-S对照组(P<0.001)。结论:1过表达AKAP121对HT22-谷氨酸氧化应激模型有保护作用。2过表达S-AKAP84,OMM-PKAc通过磷酸化Drp1增大了HT22细胞线粒体的融合度。3过表达AKAP121,OMM-PKAc增加了HT22细胞胞内总GSH,线粒体SOD2含量,减少了线粒体部分的超氧阴离子。4过表达线粒体分裂蛋白Drp1-656D-PKA假磷酸化质粒可以模拟PKA/AKAP121对HT22-谷氨酸氧化应激模型的保护作用。5 HT22-Resistance谷氨酸抵抗细胞系的AKAP121蛋白水平,胞内CREB信号,线粒体SOD2含量是升高的。