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超氧化物歧化酶(SOD)是需氧生物体内唯一的超氧阴离子自由基清除剂，具有较强的抗氧化活性，其制剂可广泛应用于医药、食品及化妆品领域；但天然酶稳定性差、半衰期短，限制了其产业化应用。甘肃省拥有丰富的葡萄酒泥资源，是开发SOD的较佳原料。本研究以葡萄酒泥酵母为原料，优化建立SOD提取工艺，将粗酶液离子交换纯化后，采用壳聚糖固定化葡萄酒泥酵母SOD，并对其稳定性进行比较。主要结果如下：1.以SOD比活力为考察指标，分别采用超声波辅助法和超声波辅助蜗牛酶法分离提取葡萄酒泥酵母SOD。通过正交试验确定超声波辅助法最佳工艺条件为料液比1:2.5、超声功率400W、超声时间16min、热变性温度45℃，在此条件下，分离提取的SOD比活力为169.32U/mg；在超声功率400W、超声时间12min、质量浓度2.0%蜗牛酶液1mL、pH6.6、37℃条件下，超声波辅助蜗牛酶法分离提取的SOD比活力最高，可达192.27U/mg。2.以葡萄酒泥酵母为基料，采用超声波辅助酶法分离提取SOD，经热处理和DEAE-Sephadex A50离子交换层析纯化后，酶比活力纯化倍数可达27.48倍，回收率为15%；经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（(SDS-PAGE)测定其达到电泳纯，分子量约为32kDa。3.以葡萄酒泥酵母SOD纯化液为试材，壳聚糖为固定载体，通过单因素正交实验优化其工艺参数。结果表明5mL比活力为1219.3U/mg的SOD样液与0.4g用0.6%戊二醛活化的壳聚糖在25℃的条件下充分反应1.5h，所得的固定化酶活力为280.79U/mg。4.通过与天然酶比较表明，固定化SOD比天然SOD热稳定性提高了26.16%，酸碱稳定性提高了43.61%，半衰期延长了77.5天。对各种金属离子的稳定性都有不同程度的提高，其中Na+、Ca2+对天然SOD和固定化SOD活性影响都不大，低浓度的Cu2+和Zn2+对天然SOD和固定化SOD影响较高浓度的大，高浓度Zn2+对天然SOD和固定化SOD具有激活作用，Fe2+对天然SOD和固定化SOD表现有抑制作，且对天然SOD抑制程度最大。