本论文研究了IL-6受体存在方式对新生大鼠海马神经元应答细胞因子IL-6的影响。 我们首先用含B27添加物的Neurobasal无血清培养液体外培养了新生大鼠海马神经元。免疫荧光细胞化学检测表明,通过B27培养液建立的原代神经元具有很高的数量和纯度,神经元和神经胶质细胞比例得当,适于进行膜结合型IL-6受体的定位研究。 我们利用免疫荧光标记的方法,通过激光共聚焦显微镜确定了神经元存在颗粒状分布的膜结合型IL-6受体。神经元IL-6受体的表达量大于神经胶质细胞。免疫荧光结果推翻了认为神经元因为缺少膜结合型IL-6受体而不能应答IL-6的推断。 我们建立了Western Blotting的蛋白表达检测体系,以进一步探明神经元IL-6受体的存在方式对其应答IL-6的影响。 利用Western Blowing实验体系,我们以磷酸化的STAT3为指标,验证了神经元缺乏可溶性IL-6受体时不能有效应答IL-6。然后,我们采用饥饿处理来去除培养液中的可溶性IL-6受体,比较了饥饿处理和正常对照之间IL-6信号的激活差异。我们发现饥饿处理能够阻断神经元IL-6的应答,而正常培养的神经细胞则可应答IL-6。最后我们得出结论：神经元的IL-6信号通路主要由可溶性的IL-6受体介导；神经元具有膜结合型的IL-6受体,但是不能直接激活IL-6的信号转导过程。