烷化剂尤其是N-亚硝基类烷化剂广泛存在于环境中,引起DNA烷基化。其中单功能烷化剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)是最常用于研究N-亚硝基类烷化剂的模式化学诱变剂和致癌剂,它能和DNA及蛋白质等生物大分子形成加合物(adduct),这些加合物最终可导致染色体异常,点突变和细胞死亡。其引起的与突变有关的主要DNA损伤类型是O~6-甲基鸟嘌呤,这种损伤与肿瘤尤其是胃癌的发生密切相关。 我们实验室曾用一特殊的突变检测系统,直接证明DNA损伤剂可在哺乳动物细胞诱发非定标性突变:首先用低浓度(0.2μM)的短寿烷化剂MNNG(半寿期为1.1h)处理细胞2.5h后,继续培养24h,将重组有用作突变检测的靶基因supFtRNA基因的穿梭质粒pZ189转入细胞复制,发现在未受致癌物直接攻击的穿梭质粒中有较自发突变率高5倍以上的靶基因突变。这种突变并非在接受MNNG攻击以后立刻出现,而是具有时相依存性,在致癌物攻击后其发生率逐渐升高,在12h达最高峰,以后逐渐下降。且突变谱明显不同于由MNNG直接攻击引起的定标性突变,有其突变好发部位的序列特异性。 进一步地,我们还证明了低浓度MNNG的作用下有广泛的细胞反应,尤其是在信号转导通路的激活和基因表达的改变的研究中取得了一些突破性的进展。例如细胞表面受体如表皮生长因子受体、肿瘤坏死因子受体发生聚簇,内质网