用免疫组化、RT-PCR两种方法,分别从蛋白、基因层面测定放射性肺损伤大鼠在不同时间点,四种因子的表达变化,研究益气活血方对放射性肺损伤的防治作用,揭示其可能的作用机制。健康雌性成年SD大鼠共108只,随机分为模型组(model group)36只、空白对照组(control group)36只、照射加中药组(Chinese herbology group)36只。模拟机下定位确定照射区域,照射野一般为3×3cm大小,5Gy/次,共6次,每周2次。模型组、中药组大鼠用6MV-X直线加速器照射其右肺,对照组只进行麻醉,不行照射。中药组大鼠于受照射当天开始,用益气活血方1ml灌胃,2次/日,模型组及对照组用蒸馏水1ml灌胃,2次/日,停止时间为照射结束后2周。三组大鼠分别于照射后第2,4,8,12,16,20周末随机抽取6只,取其右肺组织保存。用RT-PCR方法检测TGF-β1、TNF-a、NOS3、MT HFR mRNA在各时间点表达,用免疫组化法检测TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR在各时间点的蛋白表达,实验数据用SPSS.19.0做统计分析。中药与模型组TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR mRNA及免疫组化表达积分光密度(IOD)值于照射后第2周至20周表现出先增高后下降的趋势,第2周开始升高,第8周达高峰,12周开始下降,16周后逐渐降低,与对照组相比,变化具有统计学意义。中药组与模型组相比TGF-β1、TNF-a表达降低,NOS3、MTHFR表达增高,均具有统计学意义。研究显示TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR可能为放射性肺损伤发生的敏感因子。益气活血方在放射性肺损伤各阶段,从转录及翻译层面对TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR的表达进行调控,使TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR表达趋于平衡,从而减轻放射性肺损伤,这可能是该药防治放射性肺损伤的分子生物学机制。放射治疗结束后各相关细胞因子仍持续高表达到16周,提示放射性肺损伤治疗时间应延长到治疗结束后2-3个月,不同时间,治疗重点及治则各有侧重。