脑血管病(cerebrovascular diseases，CVD)以其高发病率，高死亡率，高致残率而严重危害人类健康，是目前人类三大死亡原因之一。其中缺血性脑血管病(ischemic cerebrovascular diseases，ICVD)占到70％。研究表明，绝经期前的女性比同年龄男性的卒中发生率低，而绝经期后女性卒中发生率明显增高，这提示雌激素在ICVD中起重要作用。17-β雌二醇是雌激素的主要成分之一，其生物学效能最强。近几年来，人们发现神经生长因子(nerve growth factor，NGF)及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)对神经细胞具有重要的保护作用和促进神经功能恢复作用。随着研究的深入，NGF、BDNF对脑缺血的保护作用日益受到重视。但关于雌激素与NGF、BDNF在脑缺血再灌注损伤时的关系尚无报道。本实验通过用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，观察雌二醇对NGF、BDNF表达的影响；并观察脑缺血再灌注后大鼠神经功能、脑组织病理变化和脑梗死体积，探讨雌激素的脑保护作用机制，为雌激素防治脑血管病提供理论依据。 材料与方法 72只健康雄性Wistar大鼠(体重250-290克)被随机分为三组。A组为假手术组(8只)，B组为手术对照组(32只)，C组为雌二醇用药组(32只)。B组和C组又根据再灌注时间的不同各分为3h、6h、12h、24h四个小组，每小组8只。C组大鼠于术前7天每日腹腔注射17-β雌二醇0.1mg/kg共七天；A，B组每日均给予等量的花生油(溶解雌二醇的溶剂)腹腔注射。用线栓法制作脑缺血/再灌注损伤模型。A组一律在术后6小时断头取脑，B组和C组大鼠均在缺血2h分别再灌注3h、6h、12h、24h后断头取脑，在视交叉前后各1mm处作冠状切面，置4％多聚甲醛中固定24h，流水冲洗24h，石蜡包埋，切片厚4μm，分别进行苏木素-伊红(H.E)和免疫组化染色。另取20只大鼠，同样分A(4只)，B(8只)，C(8只)三组，在脑缺血2h再灌注24h后断头取脑，冻至适当硬度后郑州大学2003届硕士毕业论文17一p雌二醉对大鼠脑缺血再灌注后NGF、BDNF表达的影响作Zmm厚的冠状切片，用2%红四氮哇Q，3，，印蚀昨怕想团加m ch的垃允工R二)对脑片染色，以观察梗死灶的部位和范围，并测量梗死体积。结果 1.假手术组大鼠均无神经功能缺失症状。手术对照组和雌二醇组大鼠术后出现手术对侧(右侧)肢体瘫痪，以前肢为重，部分出现爬行时向右转圈现象。雌二醇组神经功能明显改善，神经功能评分明显低于手术对照组(P<0.05)。 2.TI，C染色显示假手术组脑片染成均匀红色，无梗死灶。手术对照组和雌二醇组均出现染成苍白色的梗死灶，位置恒定于大脑中动脉供血的额、顶叶皮质及墓庆节区。缺血2h再灌注珑时，雌习卿到以妙叫略较季和拐热湿著翁“(P司.叮)。 3.光镜下可见假手术组无梗死灶，神经元结构、形态正常，间质致密无水肿。手术对照组梗死灶明显，位于基底节，皮质下白质和皮层。缺血区神经细胞明显减少，残存神经细胞胞体缩小变形，核固缩，胞浆浓缩呈深伊红染色，神经元纤维疏松，间质水肿明显。雌二醇组梗死灶位于基底节及皮层下白质，少数扩展至皮层。多数神经元结构较完整，形态相对正常，间质水肿轻。 4.在损伤区皮层，缺血2h再灌注6h后，手术对照组NGF表达达高峰，再灌注24h后，回复到假手术组水平;缺血Zh再灌注12h后，雌二醇组NGF表达达高峰，再灌注24h后，表达仍高。再灌注12h、24h时，雌二醇组NGF表达明显高于手术对照组(P<0.05)。 5.在损伤区皮层与纹状体，缺血2h再灌注6h后，手术对照组BDNF表达达高峰，再灌注24h后，回复到假手术组水平;缺血2h再灌注12h后，雌二醇组NGF表达达高峰，再灌注24h后，亦回复到假手术组水平。再灌注12h时，雌二醇组NGF表达明显高于手术对照组(P<0 .05)。结论 1.脑缺血/再灌注损伤后大鼠脑内NGF，BDNF表达水平升高，可能是神经细胞的一种自我保护机制。 2.17一p雌二醇可显著上调NGF、BDNF的表达，改善脑缺血后大鼠神经功能和脑组织病理变化，缩小脑梗死体积，对脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用，且在再灌注12h最明显。 3.17一p雌二醇有望成为新的脑保护剂在防治脑梗塞中发挥作用。