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在临床和营养学研究中,自由基和抗氧化剂是比较热门的话题。大量的研究表明机体内过量自由基的产生会导致机体发生病变,包括衰老、癌症和其他常见的慢性疾病。越来越多的人们意识到,每天补充膳食维生素和抗氧化剂是非常重要的。近几年,抗氧化剂广泛应用到每日的膳食中,可以预防或改善一些慢性疾病。含硫钠盐/钾盐是常见的化学试剂,经常应用于化学、食品、制药行业。目前未见含硫钠盐/钾盐抗氧化和清除自由基活性的报道。本文通过几种不同的分析方法测定含硫钠盐/钾盐抗氧化和清除自由基的能力。在常见的抗氧化剂使用中,合理配伍的复合抗氧化剂有助于提高抗氧化的性能,本文对三种常见抗氧化剂(谷胱甘肽、维生素C和依达拉奉)及配伍的复合抗氧化剂的抗氧化活性进行研究,为筛选出安全、有效的复合抗氧化剂提供一定的实验基础。主要研究结果如下:一、含硫钠盐/钾盐抗氧化和清除自由基的活性研究目的:利用体外和体内实验,采用测定抗氧化剂的抗氧化和清除自由基活性的研究方法,对九种含硫钠盐/钾盐的抗氧化能力、还原能力、清除超氧阴离子活性、清除羟自由基活性、金属铁离子螯合能力及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等的变化进行测定分析。方法:1、体外实验:(1)通过测定含硫钠盐/钾盐的总抗氧化能力、还原能力、清除羟自由基能力、清除超氧阴离子能力和金属铁离子螯合能力,比较分析九种含硫钠盐/钾盐的抗氧化活性强弱。(2)通过含硫钠盐/钾盐的抗氧化和清除自由基活性的动力学测定,比较分析九种含硫钠盐和钾盐抗氧化和清除自由基的动力学特征。2、体内实验:选取体重20-22g健康成年雄性昆明鼠,随机分为硫酸钠组、硫酸钾组、亚硫酸钠组、亚硫酸钾组、硫代硫酸钠组、硫代硫酸钾组、低亚硫酸钠组、偏重亚硫酸钠组、偏重亚硫酸钾组、Vitamin C组、自来水对照组及正常对照组。按照50mg/kg剂量,每天干预一次,连续灌胃7天,测定血清中SOD活性及MDA含量的变化。结果:1、体外实验:(1)体外实验测定含硫钠盐/钾盐的抗氧化和清除自由基的活性:除硫酸钠和硫酸钾以外的含硫钠盐和钾盐均有抗氧化和清除自由基的活性,且这种活性有一定的浓度依赖性,其活性大小与硫原子的化合价有关,含四价硫的钠盐和钾盐活性较高。(2)体外实验测定含硫钠盐/钾盐的抗氧化和清除自由基活性的动力学:本文研究发现除硫酸钠和硫酸钾外的含硫钠盐/钾盐具有清除ABTS自由基的能力,反映出具有一定的清除自由基的能力;同时证明除硫酸钠和硫酸钾外的含硫钠盐/钾盐有快速而稳定的动力学特征。2、体内实验:(1)在干预期间小鼠的存活率:在实验期间,12组小鼠全部存活,未出现死亡。(2)在干预期间小鼠体重的变化:含硫钠盐/钾盐组小鼠体重的增重低于自来水对照组,其中硫代硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸钾、偏重亚硫酸钠及偏重亚硫酸钾组的小鼠体重的增加量与自来水对照组相比较有显著性差异(**P<0.01,*P<0.05,n=5)。(3)在干预期间小鼠血糖的变化:干预组小鼠的血糖值与对照组相比较无显著性差异,且血糖值均在正常范围内。(4)干预7天后小鼠血清SOD活性的变化:除硫酸钠和硫酸钾外的其他含硫钠盐/钾盐组的小鼠血清SOD酶活性均降低,说明除硫酸钠与硫酸钾外的含硫钠盐/钾盐在小鼠体内发挥清除自由基的活性,能够清除体内的自由基,所以体内自由基的含量降低,SOD的活性低于对照组。(5)干预7天后小鼠血清MDA含量的变化:除硫酸钠、硫酸钾和低亚硫酸钠外的其他含硫钠盐/钾盐组及Vitamin C组小鼠血清MDA含量下降,表明除硫酸钠与硫酸钾外的含硫钠盐/钾盐组小鼠体内的脂质过氧化物减少,说明了除硫酸钠与硫酸钾外的含硫钠盐/钾盐在小鼠体内有抗氧化的能力。结论:在体外和体内实验中,除硫酸钠和硫酸钾外的其他含硫钠盐/钾盐均有一定的抗氧化和清除自由基的活性。在体外实验测定结果中揭示了该活性具有稳定、快速的动力学特征,有利于后续研究;在体内实验测定结果揭示了含硫钠盐/钾盐在此实验条件下,在小鼠体内无明显毒性,同时表明了含硫盐在体内也有很强的抗氧化和清除自由基的活性。二、不同抗氧化剂配伍组合对抗氧化能力的影响目的:比较依达拉奉(Edaravone)、还原型谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸(Vitamin C)三种常用抗氧化剂进行配伍组合后抗氧化能力的变化情况,为后续复合抗氧化剂的筛选及临床应用提供参考依据。方法:通过体外实验测定抗氧化剂的总抗氧化能力、还原能力、清除羟自由基能力和清除超氧阴离子能力,比较分析六组抗氧化剂的抗氧化活性强弱。结果与结论:实验结果显示,在同一摩尔浓度下,复合抗氧化剂能够协同清除自由基,并且这种抗氧化活性得到了显著的提高。这说明,在研究抗氧化剂联合使用时,需要考虑到不同抗氧化剂联用的增效作用,可为后续临床应用选择合理的复合抗氧化剂提供实验依据。