肿瘤转移基因(Metastasis-Associatde Protein，MTA)家族是一类重要的肿瘤转移相关基因，在生理和病理状态下均发挥作用，特别是与人类一些肿瘤侵袭转移关系密切。MTA3是其重要的组成成员之一，其定位于染色体2p21，含一个1548bp的可读框，编码515个氨基酸组成的蛋白质，分子量为65kd，主要参与组成具有核小体重塑活性和组蛋白去乙酰基酶复合物(Nucleosome remodeling andhistone deacetylation，NuRD)，发挥基因转录调节作用。以往研究结果显示，在乳腺癌中MTA3的表达降低，使得其对snail的转录抑制作用下降，最终引起E-cadherin表达减少，癌细胞黏连减弱易于脱落形成转移，与肿瘤的侵袭及转移能力呈负相关，起到抑制肿瘤转移的功能。但在乳腺癌转移到肺部的转移癌中，与原发性肿瘤相反的是MTA3高水平表达，揭示了MTA3在转移癌中可能有着其他的表达影响因子，调节着其他的细胞信号途径。近期研究证实在小鼠初级颗粒细胞中，MTA3可以调控小鼠颗粒细胞从G2/M过渡，促进颗粒细胞的增殖，但具体机制没有报道。这就表明MTA3在不同肿瘤中发挥着不同的作用，但MTA3在肺癌中的表达及肺癌细胞中的生物学作用都未见报道。　　 我们之前的研究发现在肺癌细胞系中，转染反义MTA3可以降低肺癌细胞的增殖能力，因此，本研究检测了MTA3在非小细胞肺癌中的表达及其与临床病理因素之间的关系，并初步探讨了其对肺癌细胞凋亡功能的调节作用。　　 材料与方法　　 1、主要材料与试剂:　　 108例原发性NSCLC蜡块，标本来自2005年到2008年在中国医科大学附属第一医院实行手术的病人，患者术前均未接受放化疗。　　 细胞系:人肺腺癌细胞系A549，H157。　　 主要抗体:兔抗人MTA3多克隆抗体(1∶100，Proteintech，Chicago，IL，USA)，鼠抗人Caspase-3多克隆抗体(1∶1000)，鼠抗人Bax多克隆抗体(1∶1000)，鼠抗人C-PARP多克隆抗体(1∶1000)，鼠抗人Bcl-2多克隆抗体(1∶1000)以上均购于Cell Signaling Technologies, MA, USA。　　 相关试剂:　　 Trizol试剂购自Invitrogen公司，realtime-PCR试剂盒购自TAKARA公司，转染试剂:HiPerFect Transfection Reagent购自德国QIAGEN公司，SP检测试剂盒以及DAB酶底物显色试剂盒(DAB-0031)购自福州迈新生物技术公司。　　 2、实验方法:　　 (1)免疫组化SP法　　 按照福州迈新免疫组化实验试剂盒步骤进行　　 (2)细胞培养　　 将A549， H157细胞在含有10％胎牛血清的DMEM和1640培养基37℃，5％CO2孵箱孵育，1-2d换新鲜培养液。当细胞长满瓶底后，用0.25％胰酶消化，进行传代。　　 (3)瞬时转染　　 细胞培养后按照QIANGENE实验说明步骤进行　　 (4)细胞凋亡实验　　 (5) westemblot杂交　　 (6)提取细胞总RNA　　 (7) realtime-PCR　　 (8)统计分析　　 结果：　　 1、MTA3在非小细胞肺癌组织中高表达且与P-TNM分期、淋巴结转移及NSCLC患者预后相关　　 我们用免疫组化检测了MTA3在108例肺癌组织中的表达和联系，发现MTA3阳性信号主要定位于细胞核，在正常支气管中成阴性表达，随着p-TNM分期及淋巴结转移而表达增加。统计结果发现:MTA3的过表达与p-TNM分期、淋巴结转移及NSCLC患者不良预后呈正相关。　　 2、干扰内源性MTA3引起肺癌A549和H157细胞系早期凋亡增多及凋亡相关蛋白的变化　　 在高表达MTA3的肺癌A549和H157细胞系中干扰掉内源性MTA3的表达，发现凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、c-PARP表达明显增多，且细胞的早期凋亡百分率增加。　　 结论：　　 1、MTA3的过表达与非小细胞肺癌的P-TNM分期及淋巴结转移呈正相;与NSCLC患者的不良预后呈正相关。　　 2、干扰内源性MTA3可以引起凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、c-PARP表达明显增多，并促进肺癌细胞早期凋亡百分率的增加。