过表达脑源性神经营养因子的神经干细胞移植对辐射暴露海马微环境的影响

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目的:探讨过表达脑源性神经营养因子(BDNF)的神经干细胞(NSCs)移植入放射性脑损伤大鼠模型后对海马微环境的影响。方法:1.从孕15天的SD孕鼠的胎鼠脑中分离海马神经干细胞并进行培养及神经干细胞表面标志物鉴定。2.GFP-慢病毒、GFP-BDNF-慢病毒感染神经干细胞。3.放射性颅脑损伤动物模型建立:选用1月龄雄性SD大鼠作为实验动物,并选择4MeV电子线,照射剂量20Gy进行放射性颅脑损伤动物模型造模。4.神经干细胞移植:将48只SD大鼠随机分为四组:正常对照组(C)、单纯照射组(R组)、照射后GFP修饰的神经干细胞移植组(R+NSCs组)、照射后GFP-BDNF修饰的神经干细胞移植组(R+BDNF-NSCs组)。全脑照射后1个月将神经干细胞移植入大鼠双侧海马内。5.移植后2周、8周Western-blot检测海马组织中BDNF、胶质源性神经营养因子(GDNF)、神经生长因子(NGF)的表达情况;免疫荧光染色观察小胶质细胞活化情况。结果:移植后2周、8周时,与R组相比,R+BDNF-NSCs组海马组织中BDNF、NGF蛋白表达均水平明显增高;移植后8周R+NSCs组和R+BDNF-NSCs组活化的小胶质细胞与R组相比并未显著减少。结论:过表达BDNF的神经干细胞移植后促进BDNF、NGF的产生,在一定程度上改善辐射暴露后的海马微环境。
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