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p230是特异性高表达于肝癌、乳腺癌等实体瘤细胞表面的糖蛋白，理论上应为一理想的肿瘤治疗靶点，因此抗p230的单克隆抗体SM5-1有良好的临床应用前景，为了克服应用鼠源抗体带来的HAMA反应，增强治疗效果，我们对SM5-1鼠源单抗进行了人源化。 首先采用5’RACE技术获得了SM5-1可变区的cDNA，经genebank检索证实为新基因。然后将SM5-1可变区的cDNA与人抗体恒定区连接，构建并表达了SM5-1的嵌合抗体。之后应用overlapping PCR技术构建并表达了SM5-1的CDR移植抗体，在此基础上，通过对可变区的FR区定点突变，获得了一个高亲和力、高活性的人源化SM5-1单克隆抗体。突变回鼠源的氨基酸残基包括重链FR区的23、24、27、28、30、48、49、71、76和88位及轻链的1、3及71位。转染CHO细胞获得了高表达的嵌合和人源化克隆。体外实验证实，嵌合和人源化SM5-1保持了鼠源抗体的高亲和力和特异性，能明显抑制p230阳性肿瘤细胞的增殖，其机制可能是通过caspase途径诱导肿瘤细胞凋亡，以及通过ADCC和CDC作用杀伤肿瘤细胞。体内实验发现嵌合SM5-1可明显抑制肿瘤的生长。 通过该课题，我们成功地对SM5-1进行了人源化，获得了有高亲和力、高特异性和高活性的嵌合SM5-1和人源化SM5-1，为其临床应用奠定了实验基础和理论依据。