烯丙基羟化酶产生菌的筛选及其生物转化制备1α-羟基维生素D的研究

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活性维生素D类药物适用于防治骨质疏松症、甲状旁腺功能亢进以及减退、营养和吸收障碍引起的佝偻病和骨软化症、假性缺钙的佝偻病和骨软化症等。其本身是人体肝和肾的代谢产物,但是从生物组织中提取这些物质的工作量巨大,收率极低,显然无法满足临床的需求。化学合成方法来制造则需进行多步的基团保护和脱保护,运用光照反应,开环和异构化,合成步骤繁多,分离纯化复杂,合成收率很低。本文采用生物转化法制备活性维生素D,为生物制备活性维生素奠定了基础。生物转化能够进行某些化学方法难于进行或不能合成的反应,产物立体构型单一,且转化条件温和。首先我们从自然界采集样品中分离并筛选了烯丙基羟化酶产生菌,得到了四株生长状况良好,转化能力强的菌种。对其进行了菌种鉴定及利用产生菌生物转化制备活性维生素D。转化过程中对转化产物的检测采用薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)。经制备HPLC,收集转化产物,通过核磁共振氢谱和质谱检测,结果表明:纯化得到的转化产物与标准品的结构一致。
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