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目的 肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α,TNF-α）由活化的巨噬细胞和T细胞产生,分跨膜型和分泌型,是一类重要的细胞因子。TNF-α具有广泛的生物学活性,包括对造血、免疫和炎症的调节,对血管和凝血的影响以及对多种器官的作用。早期研究发现TNF-α能诱导肿瘤细胞坏死或凋亡,后来发现TNF-α是介导炎症反应、细胞免疫应答及肿瘤免疫的主要细胞因子。目前已知与TNF-α有关的疾病包括:AIDS、贫血、自身免疫性疾病、肿瘤、出血性休克、移植排斥反应、结核病、白血病、糖尿病、类风湿性关节炎等。TNF-α参与了众多疾病的发生发展过程,因此在不同水平上阻断TNF-α的作用,有可能对与TNF-α有关的疾病产生治疗作用。RNA干扰是利用具有同源互补序列的双链RNA诱发序列特异性的转录后基因沉默现象,它可以通过抑制蛋白表达模拟基因敲除技术。这一天然而古老的生物途径,是多种种属中普遍存在的抵御病毒入侵、调控基因表达的机制。抑制效果的高效性、严格的序列特异性是该技术的突出特点。从利用体外合成双链RNA到通过利用质粒稳定表达小型干扰RNA诱发RNA干扰现象,这项技术被不断完善,并被广泛的应用。在研究哺乳动物基因功能、病毒的防治、肿瘤的基因治疗等方面提供了有力的工具和新的手段。本研究从C57BL/6鼠TNF-α基因序列中筛选出五个靶位点,对其分别进行RNA干扰实验。目的在于通过siRNA对TNF-α靶基因的抑制,实现对TNF-α分泌的调控。并通过分别针对五个靶位点的siRNA的干扰作用,快速筛选敏感的抑制位点,为今后克隆质粒提供最强的干扰序列。本文就位点2的干扰作用加以论述。