为了探明银杏内生细菌在抗病虫方面的潜能,本研究从浙江杭州、山东泰安、河南郑州、福建南平以及福建农林大学校内采集来的银杏样本中共分离得到154株内生细菌,从中筛选出了57株对萝卜软腐病菌Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum、番茄细菌性溃疡病菌Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis、番茄细菌性斑点病菌Pseudomonas syringae pv. tomato、西瓜细菌性果斑病菌Acidovorax avenae subsp. citrulli、水稻细菌性条斑病菌Xanthomonas oryzae pv. oryzicola、杨桃细菌性斑点病菌P. syringae pv. averrhoii病菌都有抑制作用的菌株,占分离总数的37%。对萝卜软腐病菌有拮抗作用的菌株共有65株,占分离总数的42.21%,最大透明圈半径达6.75mm。本研究经筛选后获得了2株对萝卜块茎软腐病有显著防病效果的菌株hy11、zy2,接种后,块茎发病时间延迟,病斑扩展缓慢,接种7d后的防治效果分别可达77.8%和50%。菌株hy11、zy2对萝卜幼苗软腐病的防治也有一定的效果,接种内生菌的幼苗发病率低,在发病后不易倒伏,接种7d后防治效果分别为53.3%和64.3%。另外,这两株内生菌对萝卜幼苗有明显的促生作用。经过生理生化测定、16S rDNA和gyrB基因序列鉴定,菌株hy11、zy2均为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens。为了进一步确定分离菌株的内生性,本研究选用菌株hy11,构建了携带gfp基因和kan基因的菌株hy11-gfp。采用摩擦涂叶接种后,菌株hy11-gfp在银杏叶片中的数量呈现先增后减,之后趋于稳定,其种群数量在5.54×10~4 cfu/(g.fw)左右。采用灌根法对萝卜接种后,菌株hy11-gfp在根、茎、叶中的数量均呈现先增后降的趋势。接种40 d后从银杏和萝卜体内均能分离到大量的标记细菌,说明菌株hy11能稳定存在于银杏和萝卜体内。本研究将分离得到的154株菌株利用aiiA基因引物序列通过PCR扩增,从中获得了6株含aiiA基因的内生菌株。这6株内生菌在平板上对萝卜软腐病菌没有抑制作用,但对萝卜果实和幼苗的软腐病防治均有一定的效果。其中菌株x3、gbb5的防治效果最好,都在50 %以上。而且这2株内生菌对萝卜幼苗也有显著的促生作用。经过16S rDNA序列鉴定,菌株x3为苏云金芽胞杆菌B. thuringiensis, Bt,菌株gbb5为蜡质芽孢杆菌B. cereus。