目的：检测慢性吗啡耐受大鼠脊髓microRNA (miRNA, miR)的表达谱变化,初步探讨miRNA在慢性吗啡耐受过程中的可能作用。方法：雄性SD大鼠12只,改良Yaksh法鞘内置管成功后随机分为两组：吗啡耐受组(morphine tolerant group, MT组)和生理盐水组(normal saline group, NS组),每组6只。MT组大鼠连续6d每日两次鞘内注射10μg吗啡,建立慢性吗啡耐受模型；NS组大鼠连续6d每日2次鞘内注射生理盐水20μl。第7天取大鼠脊髓腰膨大部位,每组3只大鼠标本提取RNA后运用Exiqon公司的LNA技术检测慢性吗啡耐受大鼠脊髓miRNA差异性表达谱芯片,筛选并鉴定差异表达的miRNA;每组另外3只大鼠标本应用qRT-PCR检测经miRNA芯片检测出的部分差异表达的miRNA,验证miRNA芯片的检测结果。结果：1.第1天吗啡鞘内注射后大鼠热痛阈值较生理盐水组明显升高(P<0.05)；连续鞘内注射后吗啡镇痛效果减弱,但第3天和第5天大鼠热痛阈值仍较生理盐水组高(P<0.05)；第7天吗啡注射30min后未出现明显的镇痛效果,吗啡耐受组及生理盐水组大鼠热痛阈差异无统计学意义(P>0.05)。2.经miRNA表达谱基因芯片检测发现,吗啡耐受大鼠脊髓2个miRNA表达较正常组大鼠上调,8个miRNA表达下调。3. qRT-PCR检测miRNA变化与miRNA芯片检测结果一致,其中let-7a-2、miR-873表达上调,miR-365、miR-219-5p等表达下调。结论：1.连续6天鞘内注射吗啡后大鼠出现吗啡镇痛耐受。2.慢性吗啡耐受大鼠脊髓组织miRNA表达较正常组大鼠发生改变,其中8个miRNA表达下调,2个]niRNA表达上调。