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背景和目的多项研究证明,神经发育和血管发生共用一套调节因子。神经导向因子Netrin-1及其受体UNC5B在神经轴突发育和血管发生中都起着重要作用,对神经轴突的发育和传导存在促进或抑制的双重作用。糖尿病肾病(DN)大鼠体内导入外源Netrin-1可改善蛋白尿从而对肾脏起到保护作用。对于同属于糖尿病小血管并发症的糖尿病视网膜病变,Netrin-1、UNC5B对糖尿病视网膜异常血管生成研究较多,而有关Netrin-1及UNC5B对DN中肾脏血管新生作用机制的研究较少。本文旨在通过研究Netrin-1、UNC5B在DN肾脏表达的变化,以及在体外研究其对人肾小球内皮细胞(HRGECs)迁移及成管作用的影响,从而了解其对于肾小球血管新生作用的调节及相应调节机制。对象和方法Elisa检测临床确诊DN患者尿液中的Netrin-1的变化;免疫组化、免疫荧光检测人DN组及微小病变组的肾穿组织,以及Wistar大鼠DN组和正常组中UNC5B的表达差异;体外培养人肾小球内皮细胞(HRGEC)并用特异的siRNA沉没UNC5B基因的表达,同时加入外源人重组Netrin-1、VEGF-165因子后检测细胞迁移、增殖、成管的影响,同时观察血管生成因子(VEGF)相关调节通路的变化。结果UNC5B主要表达在肾小球血管内皮细胞,Netrin-1及UNC5B在DN明显高于对照组;单纯敲除UNC5B表达后细胞迁移及成管作用无明显差异;Netrin-1因子可以抑制HRGECs迁移和成管作用,并且Netrin-1发挥作用可能与抑制Src活化(磷酸化)有关,从而抵消VEGF-165的促进血管生成作用;而UNC5B可以阻碍Netrin-1发挥作用。结论Netrin-1可以抑制肾小球内皮细胞迁移和成血管作用,并可能与抑制VEGF-A/VEGFR2下游Src的磷酸化相关;Netrin-1的抑制作用可被UNC5B抵消。UNC5B水平升高可能是DN血管新生增多的原因之一,抑制肾脏UNC5B表达同时增加外源Netrin-1有望成为抑制DN早期肾脏异常血管新生的有效方法,从而减慢肾脏损害进度。