走马胎有效成分的提取及走马胎多糖对SD大鼠体内血栓形成影响的初步研究

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走马胎为紫金牛科紫金牛属植物,全株具有活血化瘀等功效,为民间常用的跌打伤科药。目前该科属植物的研究报道很少,有关走马胎对动物体内血栓形成影响的研究国内外更鲜见报道。据此,本文实施以下相关试验:试验一走马胎有效成分多糖、皂苷和生物碱的提取和含量测定。本文分别采用紫外—可见分光光度法测定走马胎的总多糖、总皂苷和总生物碱的含量。结果表明:以葡萄糖作为对照品,走马胎多糖含量约为2.30%;以人参皂苷Rg1为对照品,走马胎皂苷含量约为1.01%;以氧化苦参碱为对照品,走马胎生物碱含量约为0.28%。试验二走马胎影响血栓形成的有效成分筛选。结果显示,与对照组相比,走马胎三种提取物在体外均能显著延长RT、APTT、PT,并抑制凝血酶的活性;与走马胎多糖组比较,走马胎皂苷组、走马胎生物碱组PT、APTT、RT显著缩短,抗凝血酶活性减弱;在光密度试验中,以走马胎多糖效果最好。综合以上研究结果,本试验锁定走马胎多糖作为进一步研究抑制血栓形成的活性成分。在走马胎影响血栓形成的有效成分筛选的基础上,观察走马胎提取液对病理模型SD大鼠体内凝血系统、血液流变学和肺组织损伤的影响。将48只SD大鼠随机分为6组,即病理模型组、生理盐水组、三七总皂苷(PNS)药物组和走马胎多糖高、中、低剂量组(分别为708mg多糖/kg、354mg多糖/kg、177mg多糖/kg)。上午9时,按1ml/100g WB剂量,分别用走马胎多糖给高、中、低剂量中药组大鼠灌胃,模型组和生理盐水组于同一时间分别灌注同等剂量的生理盐水。高、中、低剂量组和模型组于每日上午10时在相同部位按0.08 mg/kg WB剂量皮下注射肾上腺素,每日1次,连续12 d。最后一天注射肾上腺素后,取大鼠血及肺脏进行有关指标和肺组织病变观察。结果表明,与生理盐水对照组相比,病理模型组SD大鼠体内PT、APTT显著缩短(P<0.05),HGB和HCT显著升高(P<0.01)。光镜观察显示,肾上腺素诱导的病理模型组其肺泡隔明显增厚,肺泡隔和肺泡腔内可见大量血细胞漏出,肺泡上皮细胞坏死、脱落,部分肺泡塌陷、不张;与病理模型组相比,高剂量组SD大鼠体内PT、APTT和RT均显著延长(P<0.05、P<0.01),Fg含量极显著降低(P<0.01),HCT和HGB显著降低(P<0.05),高剂量组肺泡结构损伤轻微,肺泡隔厚度明显改善,肺泡腔内清晰,但仍可见少量血细胞漏出。综上所述,走马胎多糖通过延长动物体内PT、APTT、TT和RT,降低血浆Fg含量和血红蛋白的浓度,减小红细胞压积,抑制机体内、外源性凝血过程,改善血液黏度,从而阻止血栓形成和减轻肺组织损伤。
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