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目的:血压是血管内流动的血液对单位面积血管壁的侧压力,是保证组织器官血液灌注,满足机体代谢需要,进而维持机体生命的前提。它受心脏每搏输出量、心率、外周阻力等多种因素的影响,并且随着这些因素的变化不断波动。多数情况下,这种波动不是随机的,而是呈现出一定的节律。因其节律周期大约为24小时,故称之为昼夜节律(diurnal rhythm)或近日节律(circadian rhythm)。根据血压的昼夜波动情况可将其分为四型:①杓型(dippers):即夜间血压较日间下降10%～20%;②非杓型(non-dippers):夜间血压下降0%～10% ;③超杓型或深杓型( over-dippers或extreme-dippers ):夜间下降> 20% ;④反杓型(reverse-dippers):夜间血压水平高于日间者。一般认为,昼高夜低的杓型血压对于人类是相对健康的。在高血压患者、老年人、甚至部分健康人群中,其血压的昼夜节律特征可能有所改变。众所周知,随着血压水平的上升,靶器官损害及心脑血管事件发生率显著升高。但在血压整体水平相似的情况下,当其昼夜节律减弱或消失时,发生靶器官损害及心脑血管事件的危险性亦明显增加。因此,在降压治疗的同时维持血压杓型分布,对减少靶器官损害、降低心脑血管事件的发生率具有重要临床意义。虽然积极有效的非药物治疗(如调整饮食结构、减轻体重、改善生方式等)是降压治疗的基石,但目前血压的控制仍主要依赖于降压药物。不同降压机制与不同用药时间均可能会影响药物对血压及其昼夜节律的调节。充分了解不同降压药物与不同用药时间对血压昼夜节律的影响,有利于纠正异常的血压节律,维持其正常节律。虽然目前关于血压昼夜节律的形成机制尚不完全清楚,但国内外部分学者已证实内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)等内皮源性血管活性物质的血浆浓度或活性存在典型的昼夜节律,并在调节血压及其昼夜节律方面起着非常重要的作用。不同降压药物与不同用药时间对内皮源性血管活性物质的时间生物学特征及血压昼夜节律的影响尚有待深入探讨。本研究以大鼠为实验对象进行了研究,旨在探讨血压及上述内皮源性血管活性物质的昼夜节律特征及氢氯噻嗪与不同用药时间对其活性水平及昼夜节律的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠128只,10周龄,体重250-300克,随机分为四大组:早07:00灌药组(MT),晚19:00灌药组(NT),早对照组(MC)和晚对照组(NC)。灌药组给予氢氯噻嗪10mg/Kg/日,对照组分别于早07:00或晚19:00灌等体积安慰剂(蒸馏水)。每大组各32只。每大组又分4小组,每小组各8只。按上述方案饲养喂药4周后,分别于同日24小时内不同时间点(02:00、08:00、14:00、20:00)用鼠尾测压计测各组大鼠血压并处死MT组、NT组、MC组、NC组中的各一小组大鼠。分别检测大鼠血及心肌组织中NO、eNOS、ET-1的浓度或活性以及心肌组织eNOSmRNA的表达水平。应用余弦拟合法分析四组实验动物血清及心肌组织中各指标含量或活性的时间生物学特征,采用零振幅检验(zeroamplitude test)评价各检测指标的昼夜节律是否确实存在,应用方差分析法比较各均值之间差异的显著性,p<0.05视为有统计学显著性差异。结果:1经方差分析显示,给药组(MT组与NT组)血及心肌组织中NO含量、eNOS活性、心肌eNOSmRNA表达的平均水平均显著高于对照组(MC组与NC组)(P<0.05),ET-1含量显著低于对照组(P<0.05),而在MT组与NT组间及MC组与NC组间上述血管活性物质水平无显著差异(P>0.05)。提示氢氯噻嗪可影响正常大鼠的ET-1、NO、eNOS、eNOSmRNA表达。2对四组大鼠血及心肌ET-1、NO、eNOS、心肌eNOSmRNA结果应用最小二乘法进行余弦拟合,得出各自的拟合曲线及特征值。经零振幅检验示,血及心肌中各测量值均呈现典型的昼夜节律变化。MC组、NC组、MT组、NT组血心肌组织中ET-1峰值时间分别位于22:28、22:27、21:02、21:33与01:49、02:13、00:34、01:12,NO峰值时间分别位于10:40、10:26、08:53、09:27与14:33、15:03、13:10、13:33,eNOS峰值时间分别位于07:51、08:40、05:56、06:40与12:37、12:26、09:45、10:23,心肌eNOSmRNA表达最高水平出现于11:35、11:54、08:37、08:58左右。与对照组相比,NO含量、eNOS活性、eNOSmRNA表达水平在给药组的峰值及振幅较大,ET-1含量的峰值及振幅较小,上述各指标的峰值出现时间均有所提前。在MT组与NT组间及MC组与NC组间,上述各指标的峰值、振幅、峰值时间均无明显差异。提示氢氯噻嗪可影响正常大鼠上述各指标的峰值及振幅,并可使其达峰时间提前,且与用药时间无关。3方差分析显示,给药组血压平均水平显著低于对照组(P<0.05),而在MT组与NT组间及MC组与NC组间无显著差异(P>0.05),提示不同用药时间对氢氯噻嗪的降压作用无显著影响。4对MC、NC、MT、NT四组大鼠血压结果应用最小二乘法进行余弦拟合,并经零振幅检验示,四组大鼠血压呈现典型的昼夜节律变化,其峰值出现在20:40、21:10、19:28、20:05。与对照组相比,给药组峰值及振幅显著降低,峰值出现时间有所提前,而在MC组与NC组间及MT组与NT组间上述指标均无明显差异。结论:1四组大鼠血压及血和(或)心肌组织中NO、eNOS、ET-1、eNOSmRNA水平均呈现典型的昼夜节律。2不同时间灌服氢氯噻嗪后,大鼠血压及血和心肌组织中ET-1含量显著降低,血、心肌组织中NO、eNOS、eNOSmRNA水平显著升高,且与灌药时间无关。3不同时间灌服氢氯噻嗪后,大鼠血压及血和(或)心肌组织中NO、eNOS、ET-1、eNOSmRNA水平的峰值时间均有所提前,但并未打乱其正常昼夜节律,且不受服药时间影响。