LBL自组装法制备酶传感器

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LBL(Layer-by-Layer)分子沉积法(MD)是一种以带电聚合物之间的静电作用力为驱动力的逐层交替沉积制备有序分子膜的一种方法,它具有操作方便,条件温和,并能从纳米水平设计和控制膜的排列和厚度,被广泛的应用于生物化学领域.由生物技术与电子学相结合发展而成的生物传感器,使人们找到了一种探测化学等变化的新型高效探测元器件,它是一种用于物质微量分析以及分子水平快速检测的方法,在生物医学、生命科学和生物技术等领域必不可少的一种先进的检测方法与监控方法.该文采用LBL分子沉积法分别制备葡萄糖氧化酶(GOD)和辣根过氧化物酶(HRP)生物活性膜.实验通过原子力显微镜(AFM)表征手段从微观角度研究了通过LBL分子沉积法组装的酶膜的表面形貌,观察了分子沉积的形态以及变化和规律性;同时还通过紫外—可见光吸收光谱法(UV-vis)跟踪分子沉积的过程,并研究了组装溶液的浓度和组装时间对沉积量的影响.实验的结果表明LBL分子沉积法是一种均匀的分子沉积的技术,同时是动态平衡过程,到一定的时间,组装的量达到平衡.实验通过酶分子和带相反电荷的聚合物的交替沉积来制备葡萄糖氧化酶(GOD)电极,以甲酸二茂铁为电子媒介,能在0.33v的电位下,通过二茂铁的氧化峰电流的变化检测葡萄糖的浓度.随着组装的GOD层数的增加,电极的催化性能提高;当层数增加到4层以后,催化活性趋于稳定.GOD修饰电极的检测灵敏度和pH有关,在pH大于7.0时,GOD酶电极对葡萄糖的灵敏度最好且变化不大.电极的重现性能良好.采用分子沉积法制备的辣根过氧化物酶(HRP)电极,在以亚甲基蓝为电子媒介的条件下,可以检测H2O2的浓度.改变检测溶液的pH值,则检测的电位和电流灵敏度都发生变化;在pH为5.8-7.0的范围内,HRP酶修饰电极的催化活性基本不变.实验制得Au/MPS/(HRP/PSS)2电极的重现性能良好.在以亚甲基蓝(MB)为电子媒介检测电极催化反应时,能防止抗坏血酸的电活性物质的干扰,稳定性好.并且研究和评价了两类酶电极的其他性能.
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