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目的:1.在D-半乳糖（D-galactose,D-gal）腹腔注射致大鼠亚急性衰老基础上,用Aβ1-40(betaamyloid proteinl-40,Aβ1-40)联合apoE4（apolipoprotein E4,apoE4）海马注射,建立一种更为合理的AD（Alzheimer’s disease,AD）动物模型。2.探讨Aβ1-40与apoE4在AD的发病过程中是否具有协同作用。方法:1.动物筛选:经Morris水迷宫筛选出反应灵敏的雄性四月龄Wistar大鼠32只。2.实验分组:按随机数字表法将大鼠随机分为四组,即对照组、AB组、apoE4组和Aβ+apoE4组,每组8只。3.干预方法:各组大鼠每天均给予D-gal腹腔注射（50mg/kg/d）,6周后在脑立体定位仪操作下,于双侧海马CA1区注射给药。①对照组:每侧给予生理盐水2μl;②Aβ组:每侧给予Aβ1-402μ1（5μg/μl）;③apoE4组:每侧给予apoE4 2μl（0.5μg/μl）;④Aβ+apoE4组:每侧给予Aβ1-401μl（10μg/μl）+apoE4 1μl（1μg/μl）。4.指标检测:①行为学测试:2周后,Morris水迷宫实验测试各组大鼠的逃避潜伏期和跨台次数。②形态学观察:行为学测试后处死动物取脑,光镜、透射电镜观察海马的组织形态结构。③分子病理学检测:采用免疫组织化学的方法观测海马CA1区磷酸化Tau蛋白的水平。5.统计学处理:所有结果均用均数±标准差（（?）±S）表示,采用两因素两水平析因设计的方差分析方法。P＜0.05有统计学意义。应用SPSS13.0和SAS8.0统计软件处理。结果:1.Aβ与apoEA海马注射对大鼠学习记忆的影响:Morris水迷宫试验结果显示,（1）在5天的定位航行试验中,各组大鼠的逃避潜伏期均呈逐渐缩短趋势。Aβ+apoE4组缩短的较为缓慢。（2）通过对第五天各组大鼠的逃避潜伏期和跨台次数比较发现:①apoE4组、Aβ组与对照组比较,大鼠第五天的逃避潜伏期明显延长,跨台次数明显减少,有统计学意义（P＜0.01）。②Aβ组与apoE4组比较,大鼠第五天的逃避潜伏期明显延长,跨台次数明显减少,有统计学意义（P＜0.01）。③Aβ与apoE4对大鼠第五天逃避潜伏期和跨台次数的影响存在交互作用（P＜0.01）,表现为逃避潜伏期的进一步延长和跨台次数的进一步减少。2.Aβ与apoE4海马注射对大鼠海马组织形态及超微结构的影响:①光镜下,对照组海马CA1区神经细胞排列较规则,胞核较大,核仁清晰;Aβ组海马CA1区神经细胞排列不规则、稀疏,细胞界限不很清晰,细胞带不完整,其中部分胞体缩小,胞核固缩深染;apoE4组海马CA1区细胞排列不很紧密,部分胞核轻度固缩;Aβ+apoE4组海马CA1区损伤更为严重,细胞排列紊乱,神经细胞脱失严重,细胞带看不清,胞核固缩明显。②透射电镜下观察海马CA1区神经细胞超微结构的改变显示,对照组线粒体形态较规则,胞浆内散在数个脂褐素颗粒;Aβ组线粒体肿胀空泡化,粗面内质网扩张、核糖体脱落;apoE4组线粒体有轻度受损,粗面内质网和游离核糖体排列不规整;Aβ+apoE4组可见神经细胞核固缩,核周隙扩张,甚至核膜结构不清,核形态极不规则,有切迹,核仁偏位,线粒体肿胀,可见嵴断裂,空泡形成,染色质浓缩趋边聚集,核基质及胞质基质致密,细胞质内较多脂褐素颗粒沉积。3.Aβ与apoE4海马注射对大鼠海马CA1区神经元Tau蛋白磷酸化的影响:各组大鼠海马CA1区免疫阳性细胞平均灰度值比较发现,①apoE4组、Aβ组与对照组比较,磷酸化Tau蛋白的平均灰度值明显降低,有统计学意义（P＜0.01）。②Aβ组与apoE4组比较磷酸化Tau蛋白的平均灰度值明显降低,有统计学意义（P＜0.01）。Aβ与apoE4对Tau蛋白过度磷酸化的影响存在交互作用（P＜0.01）,表现为阳性细胞的平均灰度值明显降低。结论:1.Aβ1-40联合apoE4注射于D-gal致衰的大鼠海马组织所建立的AD动物模型较好的模拟了AD行为学、形态学和组织病理学的特征,是一种新的更加符合AD发病机制的动物模型。2.apoE4作为一种分子伴侣,在AD的发病过程中与Aβ具有协同作用,共同参与了AD的病理机制。