【摘 要】
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目的：设计可特异性识别并结合于HBV核心启动子(Cp)的人工转录因子(ATF)，并观察其对HBV表达的抑制作用。 方法：(1)分析及比对HBV Cp序列后确定最佳靶序列，再设计可识别该靶序列
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目的：设计可特异性识别并结合于HBV核心启动子(Cp)的人工转录因子(ATF)，并观察其对HBV表达的抑制作用。 方法：(1)分析及比对HBV Cp序列后确定最佳靶序列，再设计可识别该靶序列的锌指蛋白(ZFP)氨基酸序列;(2)逆向翻译ZFP氨基酸序列获得核苷酸序列，优化并添加核定位信号和KRAB抑制域等后获得完整ATF核苷酸序列，构建重组质粒pcDNA3.1(+)-ATF;(3)pcDNA3.1(+)-ATF转染真核细胞COS-7，RT-PCR和Western blot分别观察ATF mRNA及蛋白能否正常表达;(4) pcDNA3.1(+)-ATF转染HepG2.2.15细胞，qPCR、RT-PCR和ELISA分别检测HBV DNA、mRNA和HBeAg及HBsAg含量。 结果：(1)实验组与对照组相比，ATF mRNA和蛋白在COS-7细胞中表达正常;(2)转染HepG2.2.15细胞后，与对照组相比，实验组HBV DNA、mRNA和HBeAg及HBsAg表达均有不同程度降低。 结论：实验证实，构建的ATF在真核细胞内正常表达，并能抑制HBV表达，该研究成果有望为防治乙肝感染提供新的技术手段和理论依据。
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