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据报道,反式脂肪酸的过量摄入会引发慢性疾病,尤其是冠心病(CHD),是公众长期以来关注的焦点。反式脂肪酸主要来源于工业氢化油脂及反刍动物相关产品,工业氢化油反式脂肪酸(I-TFA)主要异构体为9t18:1(EA),反刍动物反式脂肪酸(R-TFA)主要异构体为11t18:1(VA)。流行病学研究表明,I-TFA摄入量与CHD的发生呈正相关性,因此大多数国家提倡公众在日常生活中减少反式脂肪酸的摄入;而来源于反刍动物体内的反式脂肪酸R-TFA,是否同I-TFA与CHD具有相似相关性,是否同样需要限制R-TFA摄入的问题仍在进行广泛讨论。临床研究和动物实验发现EA作用内皮细胞后,会使NF-κB的活化程度升高,同时抑制胰岛素介导的NO分泌量的释放,而VA与此过程没有显著相关性。为了排除膳食中其他成分的干扰,文晓东在实验中利用高剂量的EA和VA作用内皮细胞,观察二者对内皮细胞的影响,实验发现VA对内皮细胞的损伤程度显著低于EA。从这些研究中可以明显看出,EA会造成内皮损伤,而VA与内皮损伤较小或不损伤。在人体等哺乳动物体内,存在硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD),可部分转化VA为9c11t-CLA,转化率在11~30%之间。在动物及临床研究结果证明,9c11t-CLA具有降低CHD风险的作用。而导致VA与EA对内皮细胞损伤的差异,是由于VA在体内生物转化作用,还是VA本身具有抗炎效果尚不清晰;基于文晓东的研究结果,因此本实验的主要通过测定内皮细胞中粘附因子(ICAM-1,VCAM-1),促炎因子(IL-6),细胞膜受体蛋白TLR4及MAPKs炎症通路(ERK1/2、p38MAPK和JNK1/2三条通路)上蛋白的表达水平,研究SCD抑制剂(瘦素)和9c11tCLA对不同来源反式脂肪酸引起内皮细胞活力变化和炎症反应的影响;并利用western blot研究了细胞表面炎症反应相关受体蛋白TLR4的表达量,研究TFAs与炎症反应中受体蛋白的关系;试图解释VA与EA造成内皮细胞机理损伤差异的原因,为FA引起心血管方面疾病的病因及其防治提供科学依据。主要取得了以下研究成果:1.11t18:1在内皮细胞中可部分转化生成9c11t-CLA。11t18:1在内皮细胞中可在硬脂酰辅酶A去饱和酶生物作用下生成9c11t-CLA,且转化率达到23.1±0.79%。2.9c11t-CLA对内皮细胞中炎症具有调节作用。当与TFAs同时加入9c11t-CLA作用内皮细胞时,TFAs降低细胞活力、抑制NOS-NO系统活化、提高MAPKs蛋白(ERK1/2,JNK1/2,p-38)磷酸化能力、升高ICAM-1、VCAM-1、IL-6等炎症因子mRNA表达量的能力显著降低;说明9c11t-CLA在内皮细胞中具有显著的抗炎作用,且是9t18:1与11t18:1对内皮细胞损伤差异的主要原因。3.11t18:1也可诱导内皮细胞炎症反应的发生。当内皮细胞经硬脂酰辅酶A去饱和酶抑制剂处理后,11t18:1降低细胞活力、抑制NOS-NO系统活化、提高MAPKs蛋白(ERK1/2,JNK1/2,p-38)磷酸化能力、升高ICAM-1、VCAM-1、IL-6等炎症因子mRNA表达量的能力显著升高;说明11t18:1作用内皮细胞时,本身并不具有抗炎作用,也可诱导内皮细胞炎症反应的发生。4.TLR4介导了TFAs诱导内皮细胞炎症反应过程。9t18:1及11t18:1+硬脂酰辅酶A去饱和酶抑制剂作用内皮细胞后,细胞膜表面TLR4受体蛋白的表达量显著增加;且当细胞内TLR4蛋白活化受到抑制时,TFAs刺激MAPKs蛋白磷酸化水平及ICAM-1炎症因子表达量均有显著降低;说明TLR4受体参与TFAs诱导内皮细胞炎症反应的下游MAPKs通路。