AchGLK基因提高番茄果实品质以及青霉菌LysM家族基因的研究

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yaya_tush
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GLK基因是影响叶绿体发育,细胞分裂,衰老等的一个重要基因。从猕猴桃中克隆了1个与叶绿体发育有关的基因Ach17g471351.2(AchGLK),该基因存在两个不同的转录本,AchGLKF和AchGLK+48,两者相差48 bp。AchGLK结构保守,C端有高度保守的GCT-box,DNA结合区域(DBD)有一段AREAEAA保守序列。AchGLKF以及AchGLK+48广泛存在于红阳猕猴桃各组织中以及不同品种的猕猴桃。AchGLK+48过表达转基因番茄与野生型番茄相比则无明显差异。AchGLKF过表达转基因番茄未成熟的果实为深绿色,叶绿素a/b的含量显著增加,质体数量增多,体积变大,叶绿体的数量也显著增加,基质片层数量增加,但腔体大小无明显差异。成熟的AchGLKF转基因番茄的果皮呈深红颜色,带有深色斑点。番茄红素,β-类胡萝卜素以及总类胡萝卜素,葡萄糖、果糖、蔗糖以及可溶性固形物的含量均显著提高。代谢组分析表明,AchGLKF基因可能提高了番茄的胆碱降解,甜菜碱生物合成,藏花酸生物合成,角质生物合成,类胡萝卜素裂解等代谢途径中的部分代谢物含量。AchGLKF基因改良果实品质在实际生产应用中有着重要创新和意义。效应因子在病原微生物和宿主相互作用过程中有着重要的生理功能。首先建立了挖掘P.expansum效应蛋白的方法,共获得了45个可靠的核心效应蛋白基因以及104个重要效应蛋白基因。这些基因在青霉菌侵染水果寄主的过程可能起着重要的作用,主要包括PEX2 004440,PEX2 101850,PEX2 107240,PEX2 094840,PEX2 009280,PEX2 038230,PEX2 017860等。部分LysM家族蛋白是一类重要的效应因子,在病原菌与宿主之间信号传导和相互识别过程中有着重要的生物学功能。P.expansum共有19个LysM家族基因(PeLysM),本研究敲除了PeLysM4-PeLysM19基因,通过表型分析获得了一些重要的LysM家族基因如PEX2 025087(PeLysM12)以及PEX2 101830(PeLysM15)。深入的研究了PeLysM15基因,该基因编码果胶裂解酶。PeLysM15基因突变体的果胶裂解酶活性明显降低,但果胶酶的活性明显升高。PeLysM15基因的缺失导致P.expansum在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)平板上生长较缓,侵染水果速度加快。PeLysM15基因的突变影响青霉菌孢子管延伸,突变体在液体培养基(离体)和在苹果(活体寄主)上生长时分泌较多的NH4+,NH4+诱导苹果产生较多的自由基,加速宿主细胞的凋亡。代谢组分析表明,该基因的突变会导致P.expansum氨基酸代谢途径或氨基酸代谢有关的辅酶途径异常。获得的P.expansum效应因子,为水果采后病害的防治奠定了基础,具有重要意义。
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