鱼源嗜水气单胞菌的分离鉴定及耐药性研究

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2008~2009年,江苏、四川、广东、江西以及湖北地区的多种淡水养殖鱼类相继出现以“体表多处充血、出血,肠道、内脏不同程度的充血,严重者肌肉同时充血发炎,鱼体表出现溃疡、并伴有烂尾、烂鳍现象,腹腔内充满带血的液体”为主要症状的传染病。感染鱼的种类有鲢、鲫、草鱼、团头鲂、斑点叉尾鮰等我国重要的人工养殖淡水鱼类。本研究从自然条件下发病的多种养殖鱼体内分离到了65个菌株,部分菌株进行人工感染试验证实其具有致病力,并对所有菌株完成了形态观察和生理生化特性鉴定,测定结果显示:DFJY-001、XZBL-011和CYBH-009等54个菌株的生理生化特性与嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的生理生化特性一致,鉴定为A. hydrophila;而HACY-007和NCTTF-013等11个分离菌株的生理生化特性与温和气单胞菌(Aeromonas sobria)的生理生化特性一致,鉴定为A. sobria。A. hydrophila和A. sobria所占比例分别为83.1%和16.9%,可见A. hydrophila是主要的病原菌,既可与A. sobria混合感染鱼体,也可单独感染引起细菌性败血症。近年来随着水产养殖业的迅猛发展,A. hydrophila引起的败血症频繁发生,给我国的水产养殖业造成了较大的经济损失。然而不合理使用抗菌药物的现象时有发生,导致细菌耐药性迅速上升,其耐药性问题已经引起国内外学者的广泛关注和高度重视。本研究采用纸片扩散法和试管稀释法两种方法测定来源于4个地区的52株A. hydrophila对多种抗菌药物的敏感性,结果显示:(1)两种方法的测定结果在总体趋势上存在相似性,但纸片扩散法测定的耐药菌比例偏高,这些差异可能由于以下两方面的原因:一方面两种方法的耐药菌判定标准不同,另一方面两种方法中抗菌药物的来源不同。(2)不同地区来源的52个菌株对青霉素类、大环内酯类、磺胺类以及甲氧嘧啶的敏感性比较一致,对其全部具耐药性,但对氨基糖苷类、四环素类和喹诺酮类药物的敏感性出现了较大差别,来源于江苏地区的8个菌株对庆大霉素、氟哌酸等9种抗菌药物100%耐药,而从广东患病草鱼上分离的4个菌株耐药率最低,对多种抗菌药物敏感,四川地区与湖北地区的菌株对常用抗菌药物已经产生耐药性,但耐药菌所占比例有所不同,湖北地区的总体耐药率偏低。(3)52株A. hydrophila都是多重耐药菌株,其中以江苏地区菌株多重耐药现象最为严重,100%(8/8)同时耐GEN,KAN,STR,NM,TET,DC等16~17种抗菌药物,常用药物几乎无效;广东地区、四川地区和湖北地区分离菌株分别同时耐8~9种、9~13种和7~14种抗菌药物。(4)许多常用抗菌药物的疗效下降,但喹诺酮类抗菌药物的疗效显著,除江苏地区外,其他3个地区的44个菌株中只有个别菌株对左氧氟沙星的MIC为3.13μg /mL,绝大部分均在0.39-1.56μg/mL范围内,表明左氧氟沙星对A.hydrophila且有较好的抗菌效果。
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