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研究目的:
肿瘤抑制基因Menl所编码的蛋白称为Menin,本文着重研究MenlmRNA和Menin在4种胃癌细胞株、胃粘膜上皮细胞株、胃癌原发灶及非肿瘤组织中的表达情况,探讨其表达程度与胃癌浸润和转移特征的相关性,为胃癌浸润转移机理研究提供新的思路和靶点。
研究方法:
(1)采用RT-PCR和Westernblotting法分别检测4株胃癌细胞株(MKN-28、SGC-7901、BGC-823及AGS)和胃粘膜上皮细胞株(GES-1)中MenlmRNA和Menin的表达情况;免疫荧光法检测Menin在上述5种细胞中的定位表达。
(2)收集苏州大学附属第四医院60例胃癌患者原发灶组织和非肿瘤组织,采用RT-PCR法检测MenlmRNA的表达情况;并分析MenlmRNA的表达情况与其临床病理特征之间的关系;采用Westernblotting和免疫组织化学法进一步从蛋白水平检测Menin的表达情况,并分析Menin的表达情况与其临床病理特征之间的关系。
研究结果:
(1)RT-PCR和Westernblotting法分别在基因和蛋白水平检测MenlmRNA和Menin在4种不同分化程度的胃癌细胞株和胃粘膜上皮细胞株中的表达情况。结果表明MenlmRNA和Menin在4种胃癌细胞株中均有表达,表达随着分化程度从AGS、BGC-823、SGC-7901到MKN-28的增高而增高;与前4株胃癌细胞株相比,GES-1的表达显著增高(P<0.01)。免疫荧光检测可见Menin主要在上述5种细胞株的细胞核内表达,但GES-1的细胞质和细胞膜中也可见其表达。
(2)在60例胃癌患者中,胃癌原发灶组MenlmRNA和Menin的表达明显低于非肿瘤组织组(P<0.05)。且MenlmRNA和Menin的低表达与胃癌的较晚临床病理分期和伴有淋巴结转移两因素明显相关(P<0.05),而与患者性别、年龄、分化程度、浸润深度无明显的相关性(P>0.05)。
结论:
MenlmRNA和Menin在4种胃癌细胞株、胃粘膜上皮细胞株、胃癌原发灶及非肿瘤组织中均有表达。但表达水平有所差异,胃癌细胞株明显低于正常胃粘膜上皮细胞株,原发灶明显低于非肿瘤组织,并且上述两指标的低表达与胃癌的较晚临床病理分期和伴有淋巴结转移等因素明显相关。Menl和Menin可能参与了胃癌细胞的浸润和转移过程,它们都可能是潜在的肿瘤抑制因子。