大豆水杨酸结合蛋白基因GmSABP2的克隆及功能分析

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:longzhi2009
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在自然界中,植株经常受到各种不同的胁迫,如寒冷、干旱或者病原体侵染。为了应对这些胁迫,植物通过不同的信号转导通路来激活自身的各种防卫反应机制。SA在植物防卫反应的激活中是一个关键的信号。在许多植物(尤其是烟草和拟南芥)中,SA的重要作用都已经被证实。本研究利用电子克隆的方法从豫豆25中克隆得到GmSABP2基因,利用生物信息学软件对其进行序列分析;通过荧光定量PCR检测大豆幼苗在非生物胁迫时该基因的表达特性;通过农杆菌介导法将GmSABP2基因转入拟南芥,并利用转基因拟南芥对GmS4BP2基因进行功能分析。主要研究结果如下:1.以拟南芥SABP2序列为探针,从豫豆25中克隆得到GmSABP2基因。序列分析表明GmS4BP2基因的cDNA序列全长1235 bp,包含一个长为786 bp的开放阅读框,编码261个氨基酸,蛋白分子量为29.15 KDa,等电点为5.58。2.多序列比对表明大豆SABP2和毛白杨SABP2、可可SABP2以及烟草SABP2相似度较高。系统进化分析表明大豆SABP2和毛白杨SABP2、可可SABP2以及烟草SABP2亲缘关系较近。3.qRT-PCR结果表明,在盐胁迫和模拟干旱胁迫条件下,GmS4BP2基因的相对表达量均比正常生长条件下要高。4.在正常培养条件下,野生型植株和转基因株系均能正常萌发、生长。在高盐(150mmol·L-1 NaCl)处理条件下,野生型植株的种子萌发率为38%,12 d大小幼苗主根长为0.4 cm,成熟植株的存活率为49%;转基因株系的种子萌发率为67%,12 d大小幼苗主根长为1.1cm,成熟植株的存活率为78%。在模拟干旱(20%PEG6000)处理条件下,野生型植株的种子萌发率为31%,12 d大小幼苗主根长为0.5 cm,成熟植株的存活率为36%;转基因株系的种子萌发率为57%,12 d大小幼苗主根长为1.0 cm,成熟植株的存活率为66%。
其他文献
本研究围绕玉米群体光合与产量关系及调控这一主题,在前几年工作的基础上,于2000~2004年在山东农业大学玉米科技园进行。整个研究分五个试验。试验一以两个不同株型的玉米品种掖