Galectin-3抑制剂改良的柑橘果胶对糖尿病心房重构的影响及作用机制

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目的:目前研究显示,心房重构是心房颤动(Atrial Fibrillation,AF)产生和维持的机制之一。半乳糖凝集素-3(Galectin-3,Gal-3)具有促炎、促纤维化作用,可能导致心房重构。本实验拟建立糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)兔模型,研究DM病理状态下,Gal-3对AF诱发的影响及其抑制剂改良的柑橘果胶(Modified Citrus Cectin,MCP)对心房重构的干预作用及其机制。方法:72只健康成年兔以四氧嘧啶造模成功后,按照随机原则,分为三组:正常对照组(CN)、糖尿病组(DM)、DM+半乳糖凝集素-3抑制剂组(MCP,400mg/day/kg)。三组各24只实验兔,每组随机抽8只进行单项实验。在相同条件下喂养8周后,对实验兔的体重、空腹血糖等基础指标进行测定。(1)超声心动图测量心脏超声指标;(2)心脏离体电生理记录电生理参数以及Brust刺激下的AF诱发率;(3)应用激光共聚焦显微镜和钙荧光染色技术,评价心房肌细胞内钙水平的瞬时性变化;(4)利用Langendorff灌流法酶解出单个心房肌细胞,在全细胞贴附记录模式下观察内向L型钙通道电流(ICa,L)变化;(5)HE染色和Masson染色观察右心房肌组织形态及心房间质纤维化情况;(6)Western-Blotting比较三组炎症和纤维化相关因子在左心房组织中的蛋白表达水平。结果:(1)与CN组相比,DM组LAD明显增大(P<0.01),IVS和PWT明显增厚(P<0.01),与DM组相比,MCP组LAD明显减小(P<0.01),IVS和PWT明显减小(P<0.01),其余超声心动图参数三组间两两比较均无统计学意义(P>0.05);(2)与CN组相比,DM组IACT和AERPD明显延长(P<0.01),AF诱发率升高(126/160比5/160,P<0.01),与DM组相比,MCP组IACT和AERPD明显缩短(P<0.01),AF诱发率明显降低(30/160比126/160,P<0.01),SCL及AVWCL三组间两两比较均无统计学意义(P>0.05);(3)与CN组相比,DM组心房肌细胞内钙平均荧光强度增加(2.18±0.26比1.60±0.14,P<0.01),MCP组可明显降低心房肌细胞内钙平均荧光强度(1.69±0.22比2.18±0.26,P<0.01);(4)与CN组相比,DM组心房肌细胞ICa,L最大电流密度显著增加(7.05±1.32pA/pF比4.22±1.48pA/pF,P<0.01);与DM组相比,MCP组心房肌细胞ICa,L最大电流密度显著减小(5.26±1.29pA/pF比7.05±1.32pA/pF,P<0.01);(5)与CN组相比,DM组心房肌细胞排列紊乱,炎症细胞浸润明显,间质纤维化明显(P<0.01),与DM组相比,MCP组心房肌细胞排列较整齐,炎症细胞浸润减轻,间质纤维化减轻(P<0.01);(6)与CN组相比,DM组炎症和纤维化相关因子在左心房组织中的蛋白表达水平明显上调(P<0.05),与DM组相比,MCP组炎症和纤维化相关因子在左心房组织中的蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:Gal-3抑制剂MCP具有拮抗DM兔心房肌炎症和纤维化作用,限制DM兔心房肌电重构、结构重构和离子通道重构的发生与进展,使AF诱发率明显降低,可能为DM相关AF的临床上游防治开拓新的思路。
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