叶用莴苣(Lactuca sativa L.)产于地中海沿岸,在叶类蔬菜供应中占据重要地位,需周年供应但是其耐热性较差,温度过高难以正常栽培。所以,通过遗传转化技术提高品种的耐热性至关重要,而高效的组织培养再生体系是品种改良和创新的重要保障和基础。本研究以提高叶用莴苣耐热性为目的,建立其高效再生体系并对其遗传转化进行初步探索,筛选出抗生素的选择压,以保证转化细胞的正常生长,为后续转基因研究奠定基础和保障。研究结果如下:1.叶用莴苣PS-11再生体系的建立(1)种子的最佳消毒方法为。75%浓度的酒精表面消毒30s,无菌水反复冲洗3次后,用0.2%浓度的次氯酸钠深度消毒15min,无菌水反复冲洗5次。(2)叶用莴苣PS-11愈伤组织的诱导。取28 d无菌苗叶片作为诱导材料,以MS为基本培养基附加不同浓度配比的外源细胞分裂素(6-BA)和生长素(NAA)。该品种最佳诱导分化的培养基配方为MS + 0.2 mg/L 6-BA+ 0.4 mg/L NAA,培育28d后,出愈率达到100%。通过暗处理,使其出愈率提前2～4 d。(3)叶用莴苣PS-11不定芽的诱导。取28 d无菌苗叶片作为诱导材料时,出芽率达到78.88%,平均出芽个数为6.89。通过优化,将诱导材料调至为子叶的中间部位,使出芽率提高至87.77%,平均出芽个数为7.76。(4)叶用莴苣PS-11不定芽的诱导。结果表明:最佳诱导生根培养基是1/2 MS培养基,生根率达80.00%,平均每株生根数为7.73,根系多且粗壮。2.遗传转化过程中抗生素浓度的筛选卡那霉素(Kanamycin)质量浓度的筛选。卡那霉素的选择压初步范围定在70 mg/L～90 mg/L为诱导筛选浓度。在此浓度下,外植体材料呈枯死和变白现象在85%左右,没有形成愈伤组织和分化出芽。