麦粒灸对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力和免疫功能的干预效应研究

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目的:通过麦粒灸对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆功能和海马Aβ表达及炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量的实验研究,探讨阐明麦粒灸治疗AD的作用机理,为灸法治疗AD从肾论治理论提供实验依据。  方法:72只雄性、SPF级的SD大鼠随机分为四组,即正常对照组、AD模型组、假手术组和麦粒灸治疗组,每组18只。其中AD模型组和麦粒灸治疗组应用脑立体定位仪,将寡聚状态的Aβ25-35注射于大鼠左侧海马区造AD模型,正常组和假手术组不做造模处理。麦粒灸组于造模成功后第一天应用麦粒灸进行干预,穴位选择双侧的肾俞、涌泉,每个穴位各灸8壮,每日1次,5日为1个疗程,休息2天,共进行4个疗程(4周);假手术组于大鼠左侧海马区注射等量的生理盐水;其他两组每日定时给予抓取、固定等同等干预。4周后四组大鼠Morris水迷宫检测逃避潜伏期、平台区游泳时间与总时间百分比、穿越原平台所在位置的次数等行为学指标。行为学实验结束后处死大鼠取海马CA1区组织,部分固定后制作石蜡切片进行形态学观察,免疫组化法检测Aβ表达水平,其余部分ELISA法检测IL-1β、IL-6和TNF-α含量,组间差异采用方差分析。  结果:(1)四组大鼠Morris水迷宫实验:AD模型组与正常组和假手术组比较,对于大鼠逃避潜伏期,AD模型组较这两组明显延长,组间比较有显著性差异(P<0.01);麦粒灸组与AD模型组进行比较,麦粒灸组的逃避潜伏期较AD模型组显著缩短;AD模型组与正常组和假手术组比较,平台移除后AD模型大鼠穿过原平台位置的次数较此两组显著减少,具有显著性差异(P<0.01);麦粒灸组与AD模型组进行组间比较,麦粒灸组穿过原平台位置的次数较AD模型组显著增多,具有显著性差异(P<0.01);AD模型组与正常组和假手术组比较,在原平台象限内游泳时间占总游泳时间比率比较AD模型组降低,组间有显著性差异(P<0.01);麦粒灸组与AD模型组在原平台象限内游泳时间占总游泳时间比率比较有显著性差异(P<0.01),麦粒灸组显著升高。(2)各组大鼠海马CA1区形态学观察:正常组和假手术组海马区偶免疫反应物呈棕黄色颗粒或点状,海马齿状回结构、颗粒细胞层各层细胞排列紧密、整齐、有序;AD模型组与正常组和假手术组比较,颗粒状或斑片状的海马免疫反应物明显增,细胞浆、胞外间隙及细胞膜为这些免疫反应物的主要着色部位,细胞排列紊乱且数量较正常组减少,部分细胞胞体出现萎缩;麦粒灸组相较于AD模型组,脑内海马免疫反应物明显减少。(3)各组大鼠海马区Aβ表达水平:正常组和假手术组少量Aβ阳性神经元存在于大鼠海马区之内;大量Aβ阳性神经元存在于AD模型组大鼠海马区中,与其他三组比较Aβ表达显著增多(P<0.05);麦粒灸组与AD模型组比较,Aβ阳性细胞数量显著减少,有显著性差异(P<0.05)。(4)IL-1β、IL-6和TNF-α含量:与正常组比较,AD模型大鼠海马IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,麦粒灸组大鼠海马IL-1β、IL6和TNF-α含量显著降低(P<0.01)。  结论:(1)麦粒灸干预能够显著提高AD模型大鼠学习记忆能力,降低AD大鼠海马区免疫反应物的数量和Aβ阳性细胞数量。(2)麦粒灸干预能够降低AD大鼠海马区炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量,表明麦粒灸能够改善AD大鼠的认知功能障碍,对AD大鼠脑内神经元的具有保护和促进修复作用。(3)麦粒灸干预能够减缓神经元的退行性改变,其干预机制与抑制炎症因子有关。
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