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目的：观察粒细胞集落刺激因子（granulocyte colony-stimulating factor，G-CSF）对D-半乳糖胺/脂多糖(D-GalN/LPS)所致小鼠急性肝衰竭的保护作用，探讨G-CSF在肝衰竭中治疗作用及其抗凋亡可能机制。方法：1、采取腹腔注射D-GalN/LPS制造小鼠急性肝衰竭模型。选取三个可能影响造模成功率的指标为实验因素:D-GalN剂量、LPS剂量、稀释倍数，每个实验因素选取四个水平，利用L16(43)正交表安排试验，以小鼠24h病死率为考察指标。观察小鼠血清ALT、肝组织学改变，肝脏细胞凋亡验证造模效果，确定D-GalN、LPS致小鼠肝衰竭的理想剂量搭配。2、腹腔注射D-GalN（350mg/kg）/LPS（30μg/kg）制造小鼠急性肝衰竭模型。将雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、治疗组及正常对照组。治疗组在肝衰竭造模前96h、72h、48、24H和0H皮下注射重组人G-CSF（250mg/kg体重），对照组在相应时间点皮下注射无菌生理盐水0.2ml/只。通过检测比较各组小鼠生存率、不同时间点血清ALT水平、肝组织损伤程度证明G-CSF对急性肝衰竭小鼠保护作用；采用TUNEL染色方法检测小鼠肝组织中细胞凋亡，明确G-CSF具有减少细胞凋亡作用。使用Real-time PCR方法观察肝组织中Bcl-2、Bcl-xlmRNA表达变化。蛋白免疫印迹（Western blot）检测小鼠肝组织Bcl-2表达，进一步探讨G-CSF抗凋亡作用机制。结果:1、经方差分析造模中各因素作用主次为: D-GalN剂量>LPS剂量>稀释倍数，D-GalN剂量为350mg/kg、LPS剂量为30μg/kg、原液稀释三倍为理想造模条件。经检测小鼠ALT值、造模后肝组织HE染色以及TUNEL染色证明上述优化条件造模后符合急性肝衰竭模型。2、G-CSF对D-GalN/LPS所致小鼠急性肝衰竭具有治疗作用：G-CSF治疗可提高D-GalN/LPS所致小鼠急性肝衰竭生存率，治疗组小鼠24小时生存率为40%，高于对照组15%（χ~2=3.989, P=0.046）；造模后6h，治疗组小鼠血清ALT水平显著低于对照组（681.0±113.2VS1371±210.9t=2.882,P=0.044）；HE染色结果示对照组小鼠肝小叶结构破坏，肝索解离，肝细胞崩解、弥漫性大片坏死，残存肝细胞肿胀，大量炎性细胞浸润。G-CSF治疗组小鼠肝组织小叶结构紊乱但仍可辨，可见大量细胞肿胀，炎细胞浸润，无弥漫性大片坏死，未见肝索解离，未见大量小叶内出血。G-CSF抑制D-GalN/LPS致急性肝衰竭造模小鼠肝细胞凋亡：造模后6h，肝组织中TUNEL染色阳性细胞计数，治疗组亦低于对照组（654±64.29VS1155±192.6t=2.467P=0.033）；造模后6H经G-CSF治疗组抗凋亡基因Bcl-2表达高于对照组（4.793±0.900VS2.093±0.733；P=0.017），抗凋亡基因Bcl-xl表达同为治疗组高于对照组（0.412±0.095VS0.162±0.0737P=0.027）。结论: G-CSF可通过抑制肝组织细胞凋亡的方式对小鼠急性肝衰竭起到治疗作用，其抗凋亡作用可能通过上调肝组织内Bcl-2、Bcl-xl实现的。