芥菜型油菜多室基因Bjmc1启动子与RNA干涉分析

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:margaretclouis
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
油菜多室性状是已被证明的产量性状,有利于油菜高产。Bjmc1基因是芥菜型油菜多室基因,其两室基因BjMc1突变后导致油菜角果形成三个腔室,每角果粒数增加,单株产量增大。本研究通过BjMc1基因启动子生物信息学分析和启动子截短表达分析找到基因核心启动子区段,为后续寻找相关转录因子及多室角果形成过程的调控途经研究提供基础;本研究还通过RNA干扰BjMc1基因的表达,进一步验证多室基因在油菜角果发育过程中的功能。主要研究结果如下:1.BjMc1启动子生物信息学分析用PlantCARE数据库在线分析BjMc1基因上游启动子序列发现,该段包含有光响应元件、逆境胁迫响应元件、激素响应元件、CGTCA-motif茉莉酸甲酯响应元件、MYB转录因子结合位点、ELI-box3诱导子响应元件、CAT-box分生组织表达响应元件、5UTR Py-rich stretch高效转录相关元件等。2.BjMc1启动子核心区段的发现分两次构建了8个BjMc1启动子5’端缺失载体,P5K(-502bp),P10K(-996bp),P15K(-1568bp),P20K(-2024bp);P11K(-1118bp),P12K(-1206bp),P13K(-1314bp),P14K(-1414bp)。对转基因阳性植株的花序与12天大的小苗GUS组织化学染色。结果表明,P14K、P15K、P20K缺失载体能够驱动GUS基因在花蕾原基中表达。P5K、P10K、P11K、P12K、P13K与空载CK均不能驱动GUS基因在花蕾原基中表达。但除P5K与CK外,其余载体均能驱动GUS基因在萼片,根、茎、叶等组织中表达。结合数据库分析,推测在起始密码子上游-1414-1300bp区段为BjMc1基因在花蕾原基中表达的核心区段,CAT-box分生组织表达响应元件可能为核心元件之一。3.启动子核心区段同源性分析比较芸薹属植物Mc1基因启动子核心区段115bp发现,该序列与其他芸薹属植物的Mc1基因启动子匹配程度高。与黑芥(BniMc1)100%匹配,与甘蓝型油菜(BnaMc1)和白菜型油菜(BraMc1)匹配均达到96%,而与拟南芥(AthMc1)匹配75%。这一结果暗示启动子核心区段115bp为基因表达所必需的,且在芸薹属植物中高度保守。分析启动子序列发现,这5个启动子区段均包含CAT-box分生组织表达调控元件,说明该元件是Mc1基因表达的关键调控元件。4.RNA干涉BjMc1基因结果分析BjMc1基因序列,用改造过的载体pC2300RNAi,成功构建了RNA干涉载体pRNAi,并将其转到纯合两室植株中,获得了阳性转基因植株。对转基因阳性植株进行qRT-PCR分析和表型观察,结果显示:转基因T0代,编号R67、R79、R120,3棵表现茎尖发育异常;在转基因T1代中检测到RNA干涉降低了BjMc1基因的表达量,转基因植株叶片变得细长,叶缘齿状减少;且转基因植株角果普遍比纯合两室植株角果短,并且有部分株系出现类多室角果的表型,角果外形与多室相似,但内部只有两个腔室。结合上述结果,可以认为Bjmc1基因控制芥菜型油菜心皮发育,与芥菜型油菜角果小室数目有关。
其他文献
伴随着社会的发展和新课程改革的推进,小学教师肩负起了更为重要的责任和使命,其角色也发生了巨大的变化,他们从课程体系之外逐渐进入到课程活动内部,参与课程运行的程度不断
目的:检测NUSAP1在浆液性卵巢癌及正常卵巢组织中的表达情况,研究NUSAP1的表达与浆液性卵巢癌临床病理因素的关系及对预后的临床意义。方法:利用TCGA数据库分析NUSAP1 mRNA的
主要以主题班会内容为核心,通过对期中抽考成绩的分析,让学生了解目前的学习成绩和学习情况,找出不足与原因,认清良好的学习习惯对自己学习的重要性,并在今后的学习中摒弃不
本文通过对艾比湖流域1990年至2008年多时段的土地利用动态变化、土地利用转换的时空格局、生态系统服务价值及土地利用转换方式对生态环境质量的影响的定量分析,运用相关分
脂脉酸结合蛋白 (FABP)是一族小分子细胞内蛋白质 ,对长链脂肪酸有很高的亲和力 ,能把脂肪酸从细胞膜转运到细胞内利用位点 ,在长链脂肪酸的代谢中起重要作用。本文就脂肪酸
商业银行的信用风险管理长期以来一直是学术界和商业银行研究的重点。由于商业银行在国民经济中的特殊地位和重要作用,商业银行的安全关系着整个国民经济。对于信用风险而言,由
<正>3基因的反向生物学阶段近20年来,由于重组DNA技术的完善和应用,人们已经改变了从表型到基因型的传统研究基因的途径,而是直接从克隆目的基因出发,研究
<正>《诸福棠实用儿科学》至今已有70余载积淀,曾荣获全国优秀图书奖、国家图书奖、国家级科技进步奖等多项奖项。第8版由北京儿童医院组织全国权威专家编写,主编为江载芳、
<正> 某温度检测系统以100Ω铂电阻(Pt100)为温度传感器,需1mA 高精度恒流源为其供电,并以6位半数字电压表检测Pt100两端电压作为环境温度信号使用。要求Pt100一端接地。恒流
外界对新疆的了解具有一定的片面性。一说到新疆,就联想起沙漠、戈壁滩、骆驼、沙漠绿洲、瓜果和歌舞等,很难想到新疆现代化建设、新疆人对建设新疆的积极性等。因此,为了全