禽源沙门氏菌耐药性监测与分析

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本研究对89株禽源疑似沙门氏菌分离菌株进行了鉴定,经生化试验和血清学试验共鉴定出肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)17株,纽波特沙门氏菌(S.newport)1株,鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)6株和鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum)65株。 建立了针对肠杆菌科细菌的耐药性监测方法-微量肉汤稀释法,并用该方法监测和分析了89株禽源沙门氏菌对12种抗菌素和6种氟喹诺酮类药物的耐药性。结果表明,所有分离菌株均对阿米卡星和头孢曲松敏感;67株对链霉素、卡那霉素、庆大霉素、氨苄西林、四环素、氯霉素、氟苯尼考、头孢噻肟、头孢噻吩、头孢噻呋表现出不同程度的耐药性,其中对链霉素的耐药率最高,为43.8%,其次为四环素(30.3%),其余22株为敏感菌株。89株分离菌株中,发现有19株对萘啶酸、环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、奥比沙星、左氟沙星表现出轻度的耐药性,其余菌株为敏感菌株。 用PCR技术对67株耐药沙门氏菌的Ⅰ型整合子(Integron)基因进行了检测,结果从7株鼠伤寒沙门氏菌中检测出整合子。序列分析表明,这7株鼠伤寒沙门氏菌的Ⅰ型整合子可分为三种类型,一种大小为638bP,存在1个阅读框;另一种大小为1913bp,含1个aadA2、1个dhfrⅫ基因盒和1个阅读框;第三种大小为2013bp,有1个aadA2基因盒和1个阅读框。 采用PCR技术扩增了对喹诺酮类药物耐药的19株禽源沙门氏菌分离菌株gyrA基因QRDR,经纯化、测序和序列分析表明,19株耐药菌株中有10株第83位氨基酸发生了变异,其中有9株由丝氨酸(S)变异为苯丙氨酸(F),1株由丝氨酸变异为酪氨酸(Y)。对6种喹诺酮类药物有耐药性的6株分离菌除了第83位氨基酸发生变异外,其第87位氨基酸也发生了变异,由天冬氨酸(D)变异为天冬酰胺(N)。对萘啶酸有耐药性的1株菌的第83位氨基酸未发生变异,但第87位氨基酸由天冬氨酸(D)变为酪氨酸(Y)。由此表明禽源沙门氏菌gyrA基因QRDR区的变异与菌株对喹诺酮类药物的耐药性有一定相关性。
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