多酚提取物对小剂量辐射防护作用的实验研究

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目的:建立小剂量电离辐射小鼠模型;观察多酚提取物对小剂量辐射损伤的防护作用及多酚类化合物是否具有协同抗辐射作用。方法:实验1.小剂量辐射小鼠模型的建立与评价8周龄清洁级昆明雄性小鼠32只,随机分为空白对照组(NC组)、低剂量辐射组(L组)、中剂量辐射组(M组)、高剂量辐射组(H组)共4组,每组8只,空白对照组不辐射,低、中、高辐射剂量组分别采用辐射剂量率为0.04Gy/h/d、0.08Gy/h/d、0.12Gy/h/d的低剂量X射线照射,连续7天。试验周期内观察各组小鼠的外观和整体状况改变;辐射前后对各组小鼠称重并记录;辐射结束后立即处死动物,取肝脏、脾脏称重并计算脏器指数;取血检测小鼠外周血细胞数量;分离左侧股骨检测骨髓有核细胞数量;试剂盒检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。实验2.多酚提取物对小剂量辐射防护作用的实验研究8周龄清洁级昆明雄性小鼠40只,随机分为空白对照组(NC组)、辐射模型组(R组)、蓝莓提取物干预组(B组)、葡萄籽提取物干预组(G组)、蓝莓提取物+葡萄籽提取物复合干预组(M组)共5组,每组8只,实验周期共21天。NC组不辐射,每日蒸馏水灌胃,灌胃剂量5ml/(kg bw·d),共21天;R组每日蒸馏水灌胃,连续14天,剂量同空白对照组,第15天起采用辐射剂量率为0.08Gy/h/d的X射线连续照射7天,累计辐射剂量0.56Gy;B组采用蓝莓提取物混悬液灌胃,剂量600mg/(kg bw/d),G组采用葡萄籽提取物混悬液灌胃,剂量450mg/(kg bw/d);M组采用蓝莓提取物复合葡萄籽提取物混悬液灌胃,灌胃剂量600mg+450mg/(kg bw/d);三个干预组连续灌胃14天后开始X线辐射,同时继续干预物灌胃,辐射剂量率为0.08Gy/h/d,连续照射7天,累计辐射剂量0.56Gy。实验周期内观察各组小鼠的外观和整体状况,每3天对各小组小鼠称重并记录,实验结束后立即处死动物,取脑、肝脏、胸腺、脾脏称重并计算脏器指数;取血检测外周血细胞数量;分离左侧股骨检测骨髓有核细胞数量;试剂盒检测血清、肝、胸腺、脾脏组织匀浆SOD活性、MDA含量;试剂盒检测血清IL-2、IL-6浓度;试剂盒检测血清AST、ALT活力;取肝脏、脾脏、胸腺组织,HE染色,光学显微镜观察病理变化。结果:(1)照射后7天,L组小鼠体质量明显低于NC组以及M、H组(P<0.05);M、H组小鼠脾脏指数显著低于NC组(P<0.01)和L组(P<0.05);不同剂量辐射组小鼠外周血WBC和骨髓有核细胞数量均较NC组显著降低(P<0.05,P<0.01);与NC组比较,M组小鼠血清MDA含量显著升高(P<0.05)、SOD活性显著降低(P<0.05)。(2)与辐射模型组比较,三个干预组小鼠的外周血白细胞(WBC)数量、红细胞(RBC)数量、血小板(PLT)数量均升高,蓝莓组、葡萄籽组、复合物组显著升高WBC数量(P<0.05),复合物组升高较明显,且比蓝莓组更显著(P<0.05);蓝莓组、葡萄籽组和复合物组均显著升高RBC数量(P<0.05),且复合物组较蓝莓组、葡萄籽组显著升高(P<0.05),葡萄籽组、复合物组显著升高血红蛋白(HGB)含量(P<0.05),复合物组较明显;与辐射模型组比较,葡萄籽组、复合物组显著升高骨髓有核细胞数量(P<0.05);与辐射模型组比较,蓝莓组、复合物组对肝指数有升高趋势,复合物组较明显,但无统计学差异(P>0.05),葡萄籽组、复合物组均显著升高脑指数(P<0.05),蓝莓组也有上升趋势,三个干预组均显著升高胸腺指数(P<0.05),复合物组最明显,三个干预组对脾脏指数也有升高趋势,但无统计学差异(P>0.05);与辐射模型组比较,三组干预组均显著升高血清、肝脏、胸腺、脾脏中的SOD活性、降低MDA含量(P<0.05);与辐射模型组比较,三组干预组均显著升高血清IL-2浓度,降低IL-6浓度(P<0.05),复合物组效果最为明显;与辐射模型组比较,三组干预组均显著降低血清AST、ALT活力;与辐射模型组比较,三组干预组不同程度的改善小鼠肝脏受损程度,复合物最明显;复合物组对小鼠脾脏损伤有一定程度改善,蓝莓组、葡萄籽组未见显著改善;三组干预组不同程度的改善小鼠胸腺受损程度。结论:(1)小剂量辐射小鼠模型的最佳造模方法为辐射剂量率0.08 Gy/h/d、连续辐射7天,累积辐射剂量0.56 Gy。(2)多酚提取物对小剂量辐射损伤具有良好的保护作用;蓝莓花色苷、葡萄籽原花青素具有一定的协同作用。
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