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研究目的:卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,发病率仅次于宫颈癌和子宫体癌而列居第三位。但死亡率却占妇科肿瘤的首位,对女性的生命健康造成严重的威胁。导致卵巢癌高死亡率的原因主要包括两个方面:一方面由于其较早地发生腹腔转移,发现时大多数已是晚期阶段;另一方面,虽然初期治疗效果显著,然而很快发生化疗耐药性抵抗。因此这些因素一直以来都是卵巢癌治疗的巨大障碍。SND1是进化保守的多功能蛋白,几乎存在于所有的真核生物体内。研究表明,SND1蛋白不仅在多种肿瘤中呈高表达状态,而且促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移。本课题组前期工作发现在卵巢癌中,SND1通过促进转录因子SLUG的表达抑制EMT的标志蛋白E-cadherin,进而促进EMT的进程。近年来陆续有文献报道EMT不仅可以调节肿瘤的进展和转移,而且与肿瘤的耐药性和复发有着密切的关系。因此本研究的目的旨在探索SND1蛋白在卵巢癌细胞化疗敏感性中的作用,为避免或克服卵巢癌化疗抵抗寻找靶标,同时为提高化疗效果提供有力的理论依据。研究方法:本课题主要分为三个部分:第一部分,分别在过表达和敲低SND1蛋白的卵巢癌细胞中,采用蛋白质免疫印迹实验检测凋亡相关Marker蛋白的表达水平,观察SND1是否对细胞凋亡产生影响。第二部分,利用蛋白质免疫印迹、细胞流式、MTT和克隆形成等实验方法检测在顺铂（cisplatin）的作用下,SND1蛋白过表达或敲低对卵巢癌细胞凋亡的影响。第三部分,通过对卵巢癌芯片结果分析初步筛选出一些与凋亡及化疗敏感性相关的基因,利用Real-Time PCR筛选出与SND1具有一定相关性的基因;在加入cisplatin的情况下利用蛋白质免疫印迹、Real-Time PCR等实验技术对SND1发挥化疗敏感性作用的潜在机制进行探讨。研究结果:第一部分:过表达SND1蛋白的卵巢癌细胞中,凋亡相关Marker蛋白cleaved caspase-3、cleaved PARP和Bax的表达明显低于对照组。而敲低SND1蛋白后,上述Marker蛋白的表达高于对照组。提示SND1蛋白参与卵巢癌细胞的凋亡。第二部分:（1）加入cisplatin,无论SND1过表达组还是敲低组,凋亡相关Marker蛋白的表达均增高。但是在加入相同浓度的cisplatin时,过表达SND1蛋白的卵巢癌细胞中Marker蛋白的表达明显低于对照组;而敲低SND1蛋白,上述Marker蛋白的表达高于对照组。（2）细胞流式结果显示,加入cisplatin无论SND1过表达组还是敲低组,卵巢癌细胞的凋亡均增多。在加入相同浓度的cisplatin时,过表达SND1的卵巢癌细胞的凋亡明显低于对照组;而敲低SND1,细胞的凋亡明显高于对照组。（3）MTT实验检测cisplatin在卵巢癌细胞中的IC50。结果显示,过表达SND1的卵巢癌细胞的IC50高于对照组;而敲低SND1,其IC50低于对照组。（4）克隆形成实验结果显示,未加入cisplatin时,过表达SND1的卵巢癌细胞的克隆数量明显多于对照组;敲低SND1其克隆数量明显低于对照组。加入cisplatin,无论SND1过表达组还是敲低组,细胞的克隆数量均明显低于未加入cisplatin时;但是与对照组相比,两个实验组克隆数量的变化趋势与未加入cisplatin时是一致的。上述结果提示SND1蛋白抑制卵巢癌对化疗药物的敏感性。第三部分:（1）通过对卵巢癌芯片结果分析初步筛选出一些与凋亡及化疗敏感性相关的基因。利用Real-Time PCR验证发现GAS6与SND1的表达变化呈正相关。（2）加入cisplatin后,过表达SND1的卵巢癌中GAS6的mRNA水平的表达高于对照组,敲低SND1后GAS6的mRNA水平的表达低于对照组。（3）加入cisplatin后,无论SND1过表达组还是敲低组,GAS6和p-AKT的蛋白表达均降低。在加入相同浓度的cisplatin时,过表达SND1的卵巢癌细胞中GAS6和p-AKT的蛋白表达均高于对照组,而敲低SND1后两者的蛋白表达均低于对照组。上述结果提示SND1与GAS6很可能通过PI3K/AKT信号通路实现卵巢癌对化疗药物敏感性的调控。实验结论:（1）与对照组相比,过表达SND1的卵巢癌细胞凋亡Marker蛋白的表达降低,敲低SND1上述Marker蛋白的表达增多。说明SND1参与卵巢癌细胞的凋亡。（2）加入cisplatin后,细胞凋亡均增多。敲低SND1卵巢癌细胞凋亡较对照组增多,过表达SND1后细胞凋亡较对照组减少。说明SND1抑制卵巢癌细胞的化疗敏感性。（3）SND1可调控GAS6的表达,进而两者可能是通过PI3K/AKT信号通路实现对卵巢癌化疗药物敏感性的调控。