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卵泡刺激素，又称促卵泡激素(Follicle Stimulating Hormone，FSH)，是脑垂体分泌的可刺激卵泡的发育成熟以及精子形成的一种糖蛋白激素。其活性形式为由α亚基和β亚基形成的异源二聚体。在临床上，卵泡刺激素主要用于治疗不孕不育症，以及在辅助生殖技术（Assisted Reproductive Technology，ART）中作为超数排卵的关键药物。目前临床应用的卵泡刺激素制剂，或由尿液中提取，或基因重组技术得到。FSH制剂虽在临床具有很好的疗效，但仍存在一些局限性。首先是半衰期比较短，患者需要在生殖期连续注射一周左右且每天1-2次皮下注射，病人的用药依从性非常差。其次，FSH的有效性并不依赖于过高的药物浓度，而在于维持药物浓度在FSH阈值内窗口内的能力。所以，可长期维持FSH血药浓度在治疗窗内的长效FSH的研究成为临床应用的迫切需求。本文采用单链融合技术，将FSH β亚基与α亚基通过含有两个N-糖基化位点的多肽序列（氨基酸序列GSGSNATGSGSNATSGSTS）融合，得到具有FSH生物学活性的单链蛋白，即FSH类似物。将该单链蛋白的基因序列克隆至表达载体pcDNA3.1(+)中，利用Lipofectamine2000转染CHO-K1细胞，并通过G418加压，筛选得到CHO-FSH单克隆细胞系。将该单克隆细胞系进行扩大培养，并采用无血清驯化悬浮培养，成功建立可稳定表达长效重组FSH类似物（recombinant FSH analog，rFSH analog）的CHO-FSH细胞系。rFSH类似物表达量最大可达3mg/L。为了得到纯度较高的rFSH类似物，论文初步探究了rFSH类似物的蛋白纯化工艺。利用疏水凝胶层析、G-25凝胶层析以及DEAE阴离子凝胶层析色谱，对CHO-FSH上清液进行纯化，通过SDS-PAGE与Western Blotting等方法进行鉴定与分析，初步确定了rFSH类似物蛋白的纯化工艺。本文采用经典的卵巢增重及超数排卵实验，对rFSH类似物的生物活性进行了检测。实验结果表明：①我们表达得到的rFSH类似物蛋白具有较好的生物活性，单次注射即可显著性促进大鼠卵巢的增重，药效与8次注射对比药物（市售药物Gonal-F）相当，说明rFSH类似物的体内药效具有长效性特点。②rFSH类似物可较好的促进小鼠超数排卵，且超排效果与常用超排药物孕马血清（PMSG）相当。本论文采用单链融合技术，将FSH β亚基和α亚基融合为单链蛋白。利用CHO细胞生产得到了rFSH类似物，建立了rFSH类似物的初步纯化工艺，可得到了纯度较高的rFSH类似物。生物活性检测结果表明，生产的rFSH类似物可有效促进卵巢的增长以及超数排卵，单次注射的药效与连续8次注射市售药物Gonal-F的药效相当。