【摘 要】
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目的:观察肠宁方灌肠对溃疡性结肠炎模型大鼠炎性细胞因子及结肠黏膜机械屏障的影响,探讨肠宁方治疗溃疡性结肠炎的可能机制。材料与方法:随机将60只体重（190±10）g,6-8周龄的雄性SPF级SD大鼠分为造模组（50只）及空白组（10只）。又将造模组随机分模型组、西药组、肠高组、肠中组、肠低组,共5组,每组10只。采用三硝基苯磺酸-乙醇复合模型造模法造模,造模成功后第3天开始给药治疗,空白组及模型组
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目的:观察肠宁方灌肠对溃疡性结肠炎模型大鼠炎性细胞因子及结肠黏膜机械屏障的影响,探讨肠宁方治疗溃疡性结肠炎的可能机制。材料与方法:随机将60只体重（190±10）g,6-8周龄的雄性SPF级SD大鼠分为造模组（50只）及空白组（10只）。又将造模组随机分模型组、西药组、肠高组、肠中组、肠低组,共5组,每组10只。采用三硝基苯磺酸-乙醇复合模型造模法造模,造模成功后第3天开始给药治疗,空白组及模型组给予生理盐水2ml/次灌肠,西药组给予美沙拉嗪灌肠液0.42g/kg灌肠,肠高组、肠中组、肠低组予肠宁方水煎剂灌肠,给药剂量依次为6.88g/kg、3.44g/kg、1.72g/kg,治疗过程中密切观察大鼠一般状况,连续治疗7天。治疗结束后全部大鼠禁食不禁水24h,麻醉后腹主动脉取血处死大鼠,肉眼及光镜观察结肠黏膜组织变化,ELISA法检测血清中IL-6及IL-10的含量,RT-q PCR法检测结肠组织中Occludin m RNA、ZO-1 m RNA、Claudin-2 m RNA水平。结果:1.经肠宁方保留灌肠治疗后,肠宁方各剂量组大鼠的进食饮水量、精神状态、毛色光泽度、活动、体重、大便及肛周黏着秽浊物情况较模型组均有不同程度的改善。2.肉眼观察大鼠结肠黏膜损伤情况:与空白组相比,模型组大鼠结肠组织损伤评分显著增高（P<0.01）;与模型组相比,各治疗组大鼠结肠组织损伤评分均降低（P<0.05）。3.光镜下观察模型组大鼠可见结肠黏膜固有层腺体萎缩,排列紊乱,杯状细胞形态及分布改变,黏膜层及黏膜下层可见大量的炎细胞浸润,受累组织及周围可见坏死水肿,隐窝破坏;各治疗组大鼠均有不同程度的改善,大鼠结肠黏膜层可见炎细胞浸润,固有层腺体结构不完整,杯状细胞数目减少,隐窝不规则。4.ELISA检测结果:通过对大鼠血清中IL-6的ELISA检测可见:（1）与空白组相比,模型组大鼠血清中IL-6含量显著增高（P<0.01）;（2）与模型组相比,肠宁方各剂量组及西药组大鼠血清中IL-6含量显著降低（P<0.01）;（3）肠高组与西药组相比,差异无统计学意义（P>0.05）,肠宁方各剂量组相比较,差异无统计学意义（P>0.05）。通过对大鼠血清中IL-10的ELISA检测可见:（1）与空白组相比,模型组大鼠血清中IL-10含量显著降低（P<0.01）;（2）与模型组相比,肠宁方各剂量组及西药组大鼠血清中IL-10含量均增高（P<0.05）;（3）肠高组与西药组相比,差异无统计学意义（P>0.05）,与肠中组相比,差异无统计学意义（P>0.05）,与肠低组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。5.RT-PCR检测结果:通过对大鼠结肠中Occludin基因表达量的RT-PCR检测可见:（1）与空白组相比,模型组大鼠结肠中Occludin基因表达量显著降低（P<0.01）;（2）与模型组相比,肠宁方各剂量组及西药组大鼠结肠中Occludin基因表达量均增高（P<0.05）;（3）肠高组与西药组相比,差异无统计学意义（P>0.05）,肠宁方各剂量组相比较,差异无统计学意义（P>0.05）。通过对大鼠结肠中ZO-1基因表达量的RT-PCR检测可见:（1）与空白组相比,模型组大鼠结肠中ZO-1基因表达量显著降低（P<0.01）;（2）与模型组相比,肠宁方各剂量组及西药组大鼠结肠中ZO-1基因表达量均增高（P<0.05）;（3）肠高组与肠中组、肠低组相比,差异有统计学意义（P<0.05）,与西药组相比,差异无统计学意义（P>0.05）,肠中组与肠低组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。通过对大鼠结肠中Claudin-2基因表达量的RT-PCR检测可见:（1）与空白组相比,模型组大鼠结肠中Claudin-2基因表达量显著增高（P<0.01）;（2）与模型组相比,肠宁方各剂量组及西药组大鼠结肠中Claudin-2基因表达量均降低（P<0.05）;（3）肠高组与西药组相比,差异无统计学意义（P>0.05）,肠宁方各剂量组相比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论:肠宁方对于溃疡性结肠炎模型大鼠具有一定的治疗作用,其机制可能与减轻炎症反应,修复肠上皮组织的紧密连接,促使肠黏膜通透性降低,进而保护肠黏膜屏障的功能有关。
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