诱导幼羔卵泡发育及体外胚胎生产技术研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:simplyblue
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本文研究了运输应激、重复激素处理对诱导羔羊卵泡发育(简称“幼羔超排”)效果的影响,比较了幼羔超排后所采集卵母细胞与从屠宰场所获成年羊卵巢卵母细胞的体外成熟、体外受精及早期胚胎发育能力,并研究了精液处理方法以及在发育液中添加EDTA对幼羔卵母细胞体外受精及早期胚胎发育能力的影响,此外还开展了玻璃化冷冻保存幼羔卵母细胞技术研究,结果如下:运输应激组与对照组只均获卵数(39.3±21.2 vs 41.2±20.8枚)、只均获可用卵数(39.0±18.9 vs 38.4±17.3枚)和只均获可用卵率(98.1%vs 93.3%)均无显著性差异(P>0.05)。重复激素处理组只均获卵数、只均获可用卵数(15.0±8.8和14.2±6.3枚)均极显著性低于第一次激素处理组(40.3±10.8和38.7±9.7枚)(P<0.01),但两组只均获可用卵率无显著性差异(P>0.05)。羔山羊卵母细胞体外成熟率(70.1%)显著性低于从屠宰场所获成年羊卵巢卵母细胞(90.7%)(P<0.05)。羔山羊卵母细胞体外受精后的卵裂率和桑椹胚率(59.0%和17.4%)都极显著性低于成年山羊卵巢卵母细胞(82.4%和46.4%)(P<0.01)。羔绵羊卵母细胞利用新鲜精液进行体外受精(ⅣF)48 h的卵裂率(51.03%)显著性高于新鲜精液低温保存组(42.02%)和精液冷冻保存组(46.30%)(P<0.05),精液低温保存组(42.02%)和冷冻保存组(46.30%)间卵裂率无显著性差异(P>0.05)。在受精液和胚胎发育液中分别添加10μmol EDZA,ⅣF 48 h的卵裂率(59.0%)与对照组(50.8%)无显著差异(P>0.05),但ⅣF 120 h发育至16细胞以上胚胎的比例(100%)极显著高于对照组(46.9%)(P<0.01)。幼羔超排所生产体外胚胎进行胚胎移植的产羔率为12.5%,产下3只健康羔羊。利用含有2.5%DMSO+27.5%EG的玻璃化液(2液),采用OPS法冷冻保存羔山羊超排卵母细胞解冻后体外受精卵裂率(54.1%)显著性高于含有30%EG组(1液)和含有5%DMSO+25%EG组(3液)(27.5%和33.3%)(P<0.05);采用2液冷冻保存从屠宰场所获成年羊卵巢卵母细胞,预平衡时间分别为30s、1min、1.5min、2 min、3min,玻璃化液平衡时间均固定为25s,结果预平衡1.5min玻璃化冷冻保存卵母细胞具有最高的受精率。
其他文献
本研究通过四个试验探讨了禾王草(Pennisetum sp.)的青贮特性,以及刈割高度对禾王草干草和青贮品质的影响,比较了奶牛常用粗饲料与禾王草干草和青贮的瘤胃降解特性,研究了日粮