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噁喹酸(Oxilinic acid,OA)是喹诺酮类第二代抗菌药,对革兰氏阴性菌和一部分阳性菌有较强的抗菌效力,是国内外养殖业常用的鱼药和兽药之一。以往对其残留限量并无严格要求,但近年来,日韩等国纷纷加严噁喹酸残留限量标准,因此目前对水产品中噁喹酸残留的相关研究引起人们的普遍重视。
我国关于嗯喹酸的研究很少。我国目前检测方法不能适应当前检测要求,也没有关于噁喹酸残留消除规律的相关研究。本研究通过对噁喹酸残留检测方法的优化,对其在养殖牙鲆体内的残留消除规律进行了系统研究,旨在为水产养殖、渔药安全控制工作提供理论支持。
首先通过比较筛选国内外相关研究,确立了水产样品中噁喹酸残留的高效液相色谱检测方法。采用无水乙酸乙酯作为提取液,经匀质、离心后,将溶剂蒸发浓缩、用流动相定容,用流动相溶解定容,正己烷除去脂肪。使用高效液相色谱荧光检测器在激发波长325nm,发射波长369nm下进行检测,外标法定量。以0.02mol/L磷酸+乙腈+四氢呋喃(69:16:15)混和液作为流动相。不同浓度水平下对三种不同种类水产样品进行添加回收实验,结果表明平均回收率在79%~93%之间,相对标准偏差均小于10%,仪器检出限为1μg/kg,方法检出限为5μg/kg。各项指标与国外相关研究相当,优于国内使用同类型检测器的研究,且能够满足后续噁喹酸残留消除实验的检测要求。
在21士1℃水温条件下,对平均体重为80g的牙鲆单次(90mg/kg体重)和多次(40mg/kg体重,一天两次,连用五天)口灌噁喹酸,用高效液相色谱法检测用药后不同时间血液、肌肉、肝脏、鳃中药物浓度。绘制各组织中的残留消除曲线,并采用DASl.0药代动力学软件处理数据,主要采用非房室模型统计矩参数进行分析,参考房室参数,以此分析噁喹酸在牙鲆体内的吸收、分布、消除规律。
总体规律是噁喹酸在牙鲆体内吸收较快,各组织内分布广泛,但单次给药达峰浓度不高,维持时间较短,需多次给药才能达到有效抑菌浓度。单次给药组后期消除过程缓慢,但各组织中的残留浓度不高。多次给药组血液和肌肉在第4天达到50μg/kg的限量以下,肝脏在第8天降到限量以下;鳃部在第16天以后仍保持30μg/kg左右的药物浓度。初步建议在同样条件下多次给药休药期至少为8天,而且建议食用时应除去内脏和鳃等非食用组织。但如若遵循韩国禁用噁喹酸的标准,则同等给药条件下休药期至少为30天。并应根据具体鱼种和养殖情况调整休药期。
最后对几个沿海城市养殖场、水产市场、酒店、出口单位中比较常见,或者出现问题比较集中的水产样品进行了噁喹酸残留调查,为我国噁喹酸残留现状提供了基础资料。出口单位和酒店的样品中噁喹酸均未检出;国内问题较多,尤以市场出售产品问题最为突出。这与其遵守的残留限量标准不同密切相关,遂对当前残留限量的制定和安全控制工作提出了一些建议。