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目的:研究复制因子C4表达失调对肺腺癌临床病理特征的影响及其表达失调可能机制,为探索肺腺癌癌分子治疗靶点及预后标志物提供科学依据。方法:首先为探究肺腺癌癌组织与癌旁组织复制因子C4mRNA(RFC4mRNA)表达差异是否显著,通过在线工具基因表达谱分析交互分析(GEPIA),癌细胞系百科全书(CCLE)及UCSC Xena网站获取RFC4相关数据,包括基因拷贝数变异(CNV)、mRNA表达量,DNA甲基化数据及临床信息等数据,然后利用R语言、GraphPad Prism等软件或在线制作RFC4mRNA表达图。其次利用R语言、GraphPad Prism等软件对RFC4相关数据进行提取分析整理以探究RFC4mRNA表达差异对临床病理特征的影响。然后基于免疫组化实验半定量分析RFC4蛋白表达结果,从蛋白质水平验证RFC4mRNA表达差异对临床病理特征的影响。最后为探究RFC4mRNA表达上调机制,利用UCSC Xena网站将RFC4相关数据(基因拷贝数变异、甲基化、基因突变及RFC4mRNA)通过热图可视化,寻找RFC4mRNA表达上调相关因素,再利用直线相关性分析验证上述相关因素(仅与基因拷贝变异正相关);然后再通过CBioportal网站获取RFC4的共表达基因并对共表达基因进行KEGG pathway富集分析及GO Molecular-Function分析以探究基因拷贝数变异增加可能分子水平机制。结果:RFC4mRNA在多种癌组织中包括肺腺癌均表现为高表达,且肺腺癌组织RFC4mRNA表达显著高于癌旁组织(P<0.05)。肺腺癌患者中RFC4mRNA高表达者的死亡率和淋巴结转移率显著高于低表达者(P均<0.05)。RFC4mRNA高表达者不仅中位生存时间(50%OS)明显短于低表达者,而且中位无复发生存时间(50%RFS)也明显短于低表达者(低表达者50%OS:54.4±5.34m,50%RFS:68.17±14.07;高表达者50%OS:41.9±3.65m,50%RFS:38.9±9.55)(P<0.05)。COX风险比例回归模型分析也显示:RFC4mRNA高表达不仅是肺腺癌不良OS的独立危险因素,也是肺腺癌不良无RFS的独立危险因素(P均<0.05)。基于免疫组化实验半定量分析RFC4蛋白表达对肺腺癌临床病理特征的影响基本同上述结果一致:肺腺癌患者中RFC4蛋白高表达者的死亡率及淋巴结转移率显著高于低表达者(P均<0.05);RFC4蛋白高表达者中位生存时间明显短于低表达者,低表达者中位生存时间为53.5±6.23m,而高表达者仅为45.50±1.84m。COX比例风险回归模型分析也显示:RFC4蛋白高表达是肺腺癌不良OS的独立危险因素,RFC4蛋白高表达组的死亡风险是低表达组的1.94倍(P<0.05)。RFC4mRNA表达上调与其基因拷贝数变异扩增呈正相关,但与其甲基化或基因突变无关(P<0.05)。而基因拷贝数变异增加的具体分子机制可能同细胞周期通路、DNA复制等信号通路及微管结合、组蛋白酶活性等分子功能有关(P<0.05)。结论:RFC4在肺腺癌中表达上调,与肺腺癌不良预后相关,可作为肺腺癌预后分子标志物。RFC4可能主要通过细胞周期、DNA复制信号通路以及微管结合、组蛋白酶活性分子功能参与肺腺癌的促癌作用。