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目的：研究放疗前、后鼻咽癌患者及EBV-VCA-IgA阳性和EBV-VCA-IgA阴性者外周血T淋巴细胞亚群含量及血浆游离EBV-DNA载量变化的临床意义，研究鼻咽癌及鼻咽黏膜慢性炎组织中EBER及IL-21蛋白的表达及意义，初步探讨EBV潜伏感染与鼻咽癌患者鼻咽部微环境和外周血细胞免疫状态的关系，为揭示鼻咽癌发生发展过程中EBV潜伏感染引起机体免疫逃逸的可能机制提供依据。
方法：⑴流式细胞术检测29例放疗前和34例放疗后鼻咽癌患者，7例血浆EBV-VCA-IgA阳性和28例血浆EBV-VCA-IgA阴性者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD25+T淋巴细胞亚群数。荧光实时定量PCR检测上述样本血浆游离EBV-DNA载量。⑵采用原位杂交和免疫组化方法检测52例鼻咽癌、15例鼻咽黏膜慢性炎中EBER和IL-21蛋白的表达。
结果：①外周血T淋巴细胞亚群检测结果:鼻咽癌放疗前组CD3+、CD4+T淋巴细胞百分率及CD4+/CD8+比值均低于鼻咽癌放疗后组及EBV-VCA-IgA阳性组和阴性组，差异有统计学意义(P＜0.05);放疗前组CD8+T淋巴细胞百分率明显高于其他3组，差异有显著统计学意义(P＜0.01);放疗前组或放疗后组的CD25+T淋巴细胞百分率均高于EBV-VCA-IgA阳性组及阴性组，差异有统计学意义(P＜0.05); CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞百分率随鼻咽癌临床TNM分期进展呈递减趋势，组间差异有统计学意义(P＜0.05);CD25+T淋巴细胞百分率呈递增趋势，Ⅰ+Ⅱ期与Ⅳ期比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。②血浆游离EBV-DNA拷贝数检测结果:鼻咽癌放疗前组血浆游离EBV-DNA拷贝数均高于放疗后组、EBV-VCA-IgA阳性组和阴性组，组间差异有显著统计学意义(P＜0.01);放疗前Ⅲ期、Ⅳ期组的血浆游离EBV-DNA拷贝数明显高于Ⅰ+Ⅱ期组，组间差异有显著统计学意义(P＜0.01);放疗前Ⅳ期组的血浆EBV-DNA拷贝数高于Ⅲ期组，组间差异有统计学意义(P＜0.05)。③原位杂交和免疫组化检测结果:EBER和IL-21蛋白在52例鼻咽癌原发灶中的表达阳性率分别为92.3％(48/52)和73.2％(38/52)，在15例鼻咽黏膜慢性炎组织中的阳性表达率均为0％(0/15)，组间差异均有显著统计学意义(P＜0.01);52例鼻咽癌组织中，EBER在各临床参数组中均高表达，组间差异均无统计学意义(P＞0.05); IL-21蛋白阳性表达率在临床TNM分期Ⅰ+Ⅱ期组为92.3％（24/26），高于Ⅲ+Ⅳ期组53.8％(14/26)的阳性表达率(P＜0.01)。
结论：⑴鼻咽癌患者放疗前组外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞和CD4+/CD8+比值低于鼻咽癌放疗后组、EBV-VCA-IgA阳性组和阴性组，而CD8+T淋巴细胞明显高于其他3组;放疗前组或放疗后组的CD25+T淋巴细胞百分率均高于EBV-VCA-IgA阳性组及阴性组;放疗前组血浆游离EBV-DNA拷贝数均高于其他3组。随着鼻咽癌临床TNM分期进展，CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞百分率呈递减趋势，CD25+T淋巴细胞百分率呈递增趋势，血浆游离EBV-DNA拷贝数明显增高。提示EBV潜伏感染可能引起鼻咽癌患者机体T淋巴细胞功能异常，并因此促进了鼻咽癌的进展。⑵监测鼻咽癌患者外周血T淋巴细胞亚群及血浆游离EBV-DNA拷贝数变化情况，既可以用于鼻咽癌血清学辅助诊断，又可以作为监控放疗疗效的重要指标。⑶鼻咽癌原发灶中EBER、IL-21蛋白高表达，IL-21蛋白阳性表达率随着鼻咽癌临床TNM分期进展而降低，提示在EBV潜伏感染的鼻咽癌原发灶组织微环境中，IL-21蛋白可能起着抑制肿瘤进展的免疫调节作用。⑷鼻咽癌发生发展过程中EBV潜伏感染引起机体免疫逃逸的可能机制:(1)外周血T淋巴细胞亚群的改变，导致机体免疫功能异常;(2)鼻咽部免疫细胞因子含量的改变，导致鼻咽癌组织免疫微环境异常。