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我国奶牛业普遍存在产乳量低、奶牛发病率高、乳脂和乳蛋白含量相对不高等问题，是制约我国奶牛养殖业发展的主要因素。因而如何安全高效地提高牛奶质量已成为奶牛养殖业的首要问题。中药等天然活性物质对奶牛乳腺泌乳信号转导调控机理的研究，可以为提高奶牛乳产量、提高奶牛乳品质提供重要的理论依据和实践指导，具有极其重要的理论研究及应用价值。长久以来，已经证实中草药王不留行（Vaccaria segetalis）对雌性动物具有通乳、泌乳的特性，迄今已从王不留行中分离出多种生物活性成分，如环肽、黄酮苷、三萜皂苷、脂肪酸、类脂和单糖等，为王不留行的生物学机理研究提供了重要信息，但其如何调控奶牛乳腺上皮细胞（dairy cow mammary gland epithelial cells，DCMECs）泌乳相关信号转导通路从而促进泌乳的机理尚不清楚。本项目旨在通过体外DCMECs泌乳模型研究王不留行对DCMECs泌乳相关信号转导通路的影响，从而为其作为催乳中药在畜牧业中的使用提供真实的科学依据，并为开发利用王不留行丰富的天然资源提供一定的理论依据。研究分两部分进行。第一部分为：通过水浸提方法制备王不留行提取液，进而分别用王不留行水浸提液、雌激素（estrogen，E）以及催乳素（prolactin，PRL）处理体外培养的DCMECs，通过CASY法测定DCMECs的活力以及增殖能力；采用Western blotting方法分别检测DCMECs中泌乳相关信号分子的表达变化；第二部分为：对王不留行、E以及PRL组分别添加蛋氨酸（methionine）、乙酸钠（sodium acetate），通过CASY法测定DCMECs的活力以及增殖能力；采用Western blotting方法检测泌乳相关信号转导通路的影响。试验结果显示：1）王不留行可以显著提高DCMECs的活力以及增殖能力，王不留行组MAPK以及cyclinD1的表达明显高于对照组（P<0.05）；2）王不留行可以调控E和PRL信号转导通路。S6K1、AKT1、p-mTOR、p-STAT5、p100、GARS、催乳素受体（prolactin receptor，PRLR）以及雌激素受体（estrogen receptor α，ERα）的表达水平相较于对照组明显上调（P<0.05）；3）王不留行对乳脂合成相关信号分子的影响不显著。PPARγ的表达水平和对照组没有明显差异（P>0.05）；4）蛋氨酸可以显著提高DCMECs的活力以及增殖能力（P<0.05）。蛋氨酸可以调节乳蛋白信号转导通路，添加蛋氨酸后p100和GARS的表达得到了上调（P<0.05）；5）乙酸钠对DCMECs的活力以及增殖能力没有明显影响（P>0.05）。乙酸钠对p100、GARS、PRLR以及ERα的表达没有显著影响（P>0.05）。