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目的：血管生成素(Angiopoietin，Ang)是新近发现的、生物效应异于m管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的一族分泌型糖蛋白类细胞因子，特异性的与其酪氨酸激酶受体-2(tyrosinldnase with immunoglobulin．1ike andepidermal growth factor homology domains，Tie-2)结合，主要在肿瘤细胞和内皮细胞中表达，与肿瘤血管新生有关，其中Angiopoietin-2(Ang-2)与肿瘤血管新生关系密切。Ang-2/Tie-2在血管新生、血管重塑和创伤修复等方面起重要调节作用，尤其在多种血管新生旺盛的实体性肿瘤中表达显著，与VEGF协同调节肿瘤血管新生，影响肿瘤生长和转移。研究表明Ang-2/Tie-2在原发性肝癌呈异常表达，通过自分泌和旁分泌模式参与肝癌的发生与发展，其表达程度和相对特异性对肝癌的诊断、治疗及预后评估有重要的实际意义。可溶性Tie-2(solubleTie-2，sTie-2)是Tie-2细胞外段“脱落”于血清中产生，sTie-2可能与肝癌血管新生相关。本实验通过检测癌组织Ang-2/Tie-2和血清中sTie-2的表达状况，研究Ang-2/Tie-2及sTie-2表达与肝癌血管新生的相关性，以期寻找原发性肝癌早期诊断的新方法。
方法：研究对象 32例原发性肝癌(primary hepaticcarcinoma，PHC)患者[其中22例肝细胞性肝癌(hepaticellularcarcinoma，HCC)、6例胆管细胞性肝癌(cholangiocarcmoma，CC)和4例混和细胞性肝癌(combined hepatocholangiocarci-noma，CHCC)]手术切除的癌及癌旁组织标本。选择同期15例肝硬化(hepatic cirrhosis，HC)患者术中肝组织活检标本和1 0例外伤性肝破裂患者手术切除的肝组织标本作对照。同时取PHC、HC术前血清，以健康献血员血清作对照。技术方法采用免疫组化技术S-P法，检测肝癌及癌旁组织、肝硬化组织和肝破裂之正常肝组织中Ang-2和Tie-2的表达。以CD34抗体标记肿瘤的新生血管，依据CD34阳性表达率，计算出肿瘤的微血管密度(microvascular density，MVD)。应用夹心ELISA法定量检测PHC和HC患者术前血清和健康献血员血清中sTie-2的表达。
统计学处理应用SPSS 11.5统计软件，进行统计分析。各组表达结果，以均数±标准差(x±s)表示。各组间差异采用方差分析或t检验，相关陛分析采用pearson相关系数法。
结果：
1、在肝癌细胞中可见Ang.2阳性表达(61.999±8.796)，肝癌血管内皮细胞上可见Tie-2阳性表达(41.259±8.486)。Ang-2和Tie-2在癌旁组织的表达分别为20.656±2.619和13.992±1.913，在肝硬化组织的表达分别为21.595±2.187和14.627±1.215，在正常肝组织不表达。肝癌与癌旁组织Ang-2/Tie-2的表达差异有显著性(P值均<0.01)。肝癌、肝硬化组织中Ang-2/Tie-2的表达差异有显著性(P值均<0.05)。
2、在PHC组织中Ang-2/Tie-2的表达与MVD(73.289±3.388)呈正相关性(r<,l>=0.052，p<,1>=9.571，p<,2><0.01；t<,2>=19.43，P<,2>0.05)。sTie-2在PHC患者血清中的表达与Ang-2/Tie-2在PHC组织的表达呈正相关性(r<,1>=0.415，p<,1><0.05；r<,2>=0.532，p<,2><0.01)。
4、在PHC、CC和CHCC中Ang-2表达分别为：60.83±7.75、63.10±11.09和66.774-11.44；Tie-2表达分别为：40.15±7.62、42.32±10.59和45.76±10.64。在有无肝硬化、甲胎蛋白高低和乙肝表面抗原阴阳性的癌组织中Ang-2表达分别为：58.25±15.36和68.07±13.11，61.54±9.32和62.52±8.45，65.13±14.18和62.00±15.48；Tie-2表达分别为：41.55±8.23和40.894±9.10，39.54±9.70和43.21±6.66，42.77±7.38和40.47±9.08。PHC组织Ang-2/Tie-2的表达强弱与肿瘤组织学类型、有无肝硬化、甲胎蛋白水平、乙肝表面抗原阴阳性无关；与肝癌病理分级、侵袭l生高低关系密切。
结论：PHC组织Ang-2和Tie-2的表达与PHC血管新生及MVD有显著相关性。Ang-2/Tie-2在调节肝癌血管新生中协同作用，Ang-2通过与Tie-2特异性结合发挥生物效应，使血管雏形向幼稚型血管发展，肿瘤血管新生，新生血管网络是肝癌发展、浸润和转移的基础条件。Ang-2/Tie-2通过调节肝癌血管新生为癌细胞的增殖提供滋养。
本研究表明PHC组织Ang-2/Tie-2的表达与肝癌血管；新生及MVD密切相关，与肝癌患者术前血清中sTie-2的表达呈正相关关系。提示Ang-2/Tie-2的表达可以间接反应出PHC的血管新生状态，有助于临床评估原发性肝癌的生物学行为；sTie-2的相关性表达有可能成为PHC临床筛查与早期诊断的指标。