目的:神经系统转移是肺癌患者血行转移最常见的部位之一。表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)突变型非小细胞肺癌(Non-small Cell Lung Cancer,NSCLC)的脑膜转移发生率明显高于EGFR野生型肺癌。既往研究表明脑膜转移与NSCLC患者预后不良有关。头部放疗、全身化疗及鞘内化疗是NSCLC伴有脑膜转移的传统治疗方法。随着表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(Epidermal Growth Factor Receptor-Tyrosine Kinase Inhibitor,EGFR-TKI)等的分子靶向药物的问世,EGFR突变型肺癌的生存时间显著延长,脑膜转移发生率亦有所增加。目前,对EGFR突变型肺癌脑膜转移后的标准治疗尚未达成共识。本研究拟分析EGFR突变型肺癌脑膜转移后的基因突变状态及其对抗肿瘤治疗疗效和生存的影响,探讨此型患者脑膜转移时的分子特征及其预后因素,为肺癌的精准诊治提供依据。方法:本研究共纳入32例2016年1月至2018年11月于我院诊断的EGFR突变型NSCLC脑膜转移的患者。回顾性收集、分析患者组织、外周血及脑脊液基因检测状态、治疗方法及生存相关数据。脑膜转移发生后的治疗策略主要包括全身治疗:EGFR-TKIs治疗及全身化疗,局部治疗:全脑放疗及鞘内化疗。其中EGFR-TKIs治疗有四种形式:继续目前的EGFR-TKIs治疗,开始EGFR-TKIs治疗,从一种EGFR-TKIs治疗转换至另一种EGFR-TKIs治疗,以及在原基础上大剂量EGFR-TKIs治疗。分析脑脊液和配对血液基因突变状态以及不同治疗方法对脑膜转移病灶转归及其预后的影响。结果:对32例脑膜转移患者脑脊液中的循环肿瘤DNA(Circulating Tumor DNA,ctDNA)进行基因检测,发现13例有EGFR外显子21 1858R突变(13/32,37.5%);8 例 EGFR 外显子 19 缺失型(8/32,25.0%);EGFR 野生型 6 例(6/32,18.8%);T790M突变型1例(1/32,3.1%);EGFR外显子19缺失和T790M共突变型1例(1/32,3.1%);EGFR外显子20-C797S突变和外显子19缺失型1例(1/32,3.1%);EGFR外显子20-770突变型1例(1/31,3.1%),EGFR外显子18突变型1例(1/31,3.1%)。29例进行了与脑脊液配对的外周血基因检测,发现16例为(16/29,55.2%)EGFR野生型;4例为(4/29,13.8%)EGFR外显子19缺失型;3例为(3/29,10.3%)EGFR外显子21 L858R突变型;2例为(2/29,6.9%)HER2突变型;2例为(2/29,6.9%)EGFR T790M 突变型;1 例(1/29,3.4%)存在 ROS-1 突变;1 例(1/29,3.4%)EGFR外显子21 L858R和T790M突变型。11例患者外周血中10例存在EGFR突变,1例出现ROS-1变异,24例患者脑脊液中存在EGFR基因突变(11/29,37.9%vs 24/32,75.0%;P=0.003)。脑膜转移时的治疗方式对预后影响的分析数据显示:根据外周血及脑脊液基因检测结果转换至另一种EGFR-TKIs治疗、开始给予EGFR-TKIs或在原基础上接受大剂量EGFR-TKIs治疗的患者,其脑膜转移疾病控制率明显高于继续接受原EGFR-TKIs治疗、全身化疗或未接受抗肿瘤治疗的患者(24/24,100.0%vs 1/8,12.5%;P=0.000)。脑膜转移患者总生存时间为27.0月(95%CI,19.0-37.5),脑膜转移后中位生存时间为7.0月(95%CI,5.0-11.0),脑膜转移前中位生存时间为17.0月(95%CI,12-25.5)。与获得脑膜转移“改善/稳定”状态的患者相比,脑膜转移“进展”状态患者的中位生存时间明显缩短(n=7;3.7月[95%CI 25.5-41.8]vs n=25;4.2月[95%CI2.2-6.1];HR=10.114,95%CI 1.822-56.129;P=0.008)。3例患者在中枢神经系统临床表现再度恶化时进行了再次液体活检,脑脊液中检测出不同类型的突变,包括 MET、BRAF和EGFRamp 等。结论:EGFR突变型NSCLC患者在发生脑膜转移后,根据外周血及脑脊液基因检测结果选用EGFR-TKIs是改善患者症状和生存时间的首选诊治方案。全身化疗、鞘内化疗及头部放疗在EGFR突变型NSCLC脑膜转移治疗中的作用有待进一步研究。血浆和脑脊液的多部位液体活检及动态检测,对决定EGFR突变型NSCLC伴有脑膜转移患者的治疗方向具有积极意义。目的:肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,在中国的发病率和死亡率均为首位。随着分子检测及靶向药物的发展,EGFR突变型非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的生存期延长,同时,脑膜转移的发生率明显上升。既往研究表明脑膜转移与NSCLC患者预后不良有关。目前,脑膜转移的诊断依据为临床表现、影像诊断及细胞学,但通常脑膜转移的临床表现无特异性,影像学诊断及细胞学阳性率不高,导致难以早期诊断。故探索有效的NSCLC脑膜转移早期诊断的生物标志物,是延长NSCLC患者生存时间及降低死亡率的有效手段。本研究通过血浆及脑脊液微小RNA(microRNA,miRNA)的高通量筛选技术,结合生物信息学分析,筛选NSCLC脑膜转移相关候选生物标志物,结合靶基因表达网络分析以及通路分析,构建基于miRNA与靶基因网络及相关通路的脑膜转移预测模型及机制探索,为进一步验证提供依据。方法:本研究收集6例NSCLC脑膜转移和对照组5例非脑膜转移患者的血浆和脑脊液,共22个样本进行微囊泡小RNA测序,分别检测血浆和脑脊液差异表达miRNA,结合数据库及生物信息学分析,进一步筛选出血浆及脑脊液中NSCLC脑膜转移相关差异表达miRNA,构建基于miRNA与靶基因表达网络及相关通路的脑膜转移预测模型及机制探索。结果:对6例NSCLC脑膜转移和对照组5例非脑膜转移患者配对血浆和脑脊液样本进行了细胞外微囊泡小RNA测序。22个样本共获得441.87 M测序片段,各样品平均20.08 M测序片段。检测到1,167个miRNA,其中已知miRNA 1,131个,未曾报道的miRNA 36个。通过定量脑膜转移和非脑膜转移患者样本的miRNA表达丰度,血浆中获得差异表达miRNA18个,脑脊液中获得差异表达miRNA124个。结合数据库及生物信息学分析,血浆中筛选出13个差异表达miRNA。应用常用的miRANDA及RNAhybrid数据库进行脑脊液差异表达miRNA靶基因预测,构建miRNA与靶基因表达网络图。脑脊液中筛选出19个差异miRNA及其对应54个靶基因,注释到10条通路中。根据脑脊液差异miRNA的表达量综合分析,发现两组患者间脑脊液hsa-miR-145-5p存在显著差异,其靶基因分别注释到与细胞生长、凋亡、信号转导相关的通路中,包括PI3K-Akt、细胞表面受体、MAPK以及Wnt信号通路。结论:本研究通过对NSCLC脑膜转移和非脑膜转移患者血浆及脑脊液检测、数据库及miRNA与靶基因表达网络分析,在血浆中筛选出13个差异表达miRNA,从而为早期诊断肺癌脑膜转移提供可能。根据脑脊液差异miRNA的表达量综合分析,进行脑脊液候选miRNA筛选,最终筛选到19个miRNA及其对应54个靶基因,注释到10条通路中。综合分析,其中脑脊液细胞外囊泡hsa-miR-145-5p存在显著差异,其靶基因分别注释到与细胞生长、凋亡、信号转导相关的通路中,包括PI3K-Akt、细胞表面受体、MAPK、Wnt信号通路。为进一步基于miRNA探索NSCLC脑膜转移的发病机制和预测提供可能的依据。背景及目的:肺癌是我国乃至全球最常见的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)占比85%。随着NSCLC诊断和治疗的发展,患者的预后显著改善。然而,脑膜转移是晚期NSCLC的主要并发症之一,其发生率为5-9%,仍是严重影响患者生活质量及生存时间的难题。NSCLC脑膜转移患者预后较差,综合治疗后脑膜转移患者中位生存期仅为3个月。目前脑膜转移的治疗方法主要有包括全身化疗和靶向治疗等在内的全身治疗,鞘内化疗(Intrathecal Chemotherapy,ITC)和全脑放射治疗(Whole Brain Radiotherapy,WBRT)等在内的局部治疗,但对于最佳治疗方法仍未达成共识,尚无标准的治疗模式,是目前影响NSCLC患者生存时间的棘手问题。脑膜转移预后仍然很差。本研究目的为评估现有各种治疗方法对NSCLC脑膜转移的疗效,提供循证医学依据。全面系统检索近20年的国外文献,提取相关临床研究数据,评估现有治疗方法对NSCLC脑膜转移生存的影响,从而对这些临床研究做出系统性评价及Meta分析。方法:应用 PubMed、Cochrane Library、Web of Science 和 EMBASE 数据库检索 1999年1月到2019年9月期间发表的脑膜转移相关临床研究,系统分析影响患者脑膜转移后 OS(Overall Survival after the iagnosis of Meningeal Metastasis,LM-OS)的相关因素。这些因素包括NSCLC确诊与出现脑膜转移之间的时间间隔、脑膜转移时的活动状态评分(Performance Status,PS)、脑膜转移时伴有脑实质转移、脑膜转移时的颅外病灶转归以及治疗干预。研究由两名独立调查人员进行评估。结果:此次Meta分析纳入15项回顾性队列研究。包括1424名患者。结果显示合并脑实质转移患者 LM-OS 显著缩短(OR=1.61;95%CI,1.26-2.06;p=0.0002;I2=25%)。颅外病灶得到控制的脑膜转移患者LM-OS延长(OR=1.56;95%CI,1.17-2.07;p=0.002;I2=7%)。与未进行头部放疗相比,全脑放疗显著改善LM-OS(OR=0.74;95%CI,0.64-0.85;p<0.0001;I2=6%)。与未进行靶向治疗相比,经表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(Epidermal Growth Factor Receptor-tyrosine Kinase Inhibitor,EGFR-TKI)治疗的 NSCLC 患者 LM-OS 可显著延长(OR=0.37;95%CI,0.32-0.44;p<0.0001;I2=30%)。接受全身化疗的 NSCLC 患者的 LM-OS虽然更长(OR=0.62;95%CI,0.43-0.88;p=0.008;I2=67%),但存在明显异质性,根据EGFR突变情况进行亚组分析,结果显示与未接受化疗相比,虽然全身化疗可延长 EGFR 突变亚组患者 LM-OS(OR=0.45;95%CI,0.23-0.88;p=0.02;12=62%),但各研究之间存在明显的异质性;而对于未进行基因状态筛选亚组,接受全身化疗的患者不能获得更长 LM-OS(OR=0.85;95%CI,0.66-1.11;p=0.23;12=0%),各研究之间没有异质性。与未进行靶向治疗联合化疗相比,EGFR-TKIs联合全身化疗的 NSCLC 患者 LM-OS 显著延长(OR=0.60;95%CI,0.43-0.83;p=0.002;I2=0%)。敏感性分析表明,鞘内化疗对LM-OS的影响尚存争议。结论:NSCLC脑膜转移患者如未合并实质性脑转移、全身性疾病控制好和ECOG-PS评分高,则患者LM-OS较长。全脑放疗、靶向治疗及靶向治疗联合全身化疗治疗均能显著延长NSCLC脑膜转移患者LM-OS。对于未进行基因状态筛选的NSCLC脑膜转移患者,全身化疗不能使患者获得更长LM-OS。而仅接受全身化疗相较不接受全身化疗能否延长EGFR突变型NSCLC脑膜转移患者LM-OS存在争议,鞘内化疗在是否能延长NSCLC脑膜转移患者LM-OS方面存在争议。本系统评价的主要目的为评价现有的治疗方式治疗伴有脑膜转移的NSCLC患者的有效性,为进一步探索未来的治疗模式提供可能的依据,以期延长患者生存时间及改善生存质量。