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目的:本研究通过NF-κB和MAPK信号通路相关基因蛋白表达情况的检测探讨调气止咳方对CVA模型大鼠气道炎症的影响,探寻调气止咳方治疗CVA的可能机制。方法:(1)将SD大鼠分为以下7组:空白组、模型组、调气止咳方低、中、高剂量组(中药组,简称低剂量组、中剂量组和高剂量组)、地塞米松组和孟鲁司特组,每组10只。第一阶段:致敏。用OVA混悬液于第1,7,14天皮下联合腹腔注射致敏。第二阶段:激发。第15天起用1%OVA溶液连续雾化,1周后更换为2%OVA溶液继续雾化2周,雾化每天1次,持续30 min,共激发3周,以出现呼吸急促,头部上下点动,腹部急剧抽动和痉挛,甚至喉部可听到哮鸣音时表示造模成功。空白组均用生理盐水替代上述操作。(2)实验第21天,各实验组开始灌胃给药。模型组和空白组用生理盐水替代。(3)实验过程中观察各组大鼠的一般情况及咳嗽次数改变;实验第35天留取大鼠血清,用ELISA法检测炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平。取出肺组织,左肺用HE染色、Masson染色行病理检测,右肺用Western Blot法检测NF-κB、MAPK信号通路的MAPK p38、p-p38、NF-κB p65、p-p65的蛋白表达水平,RT-PCR法检测MAPK p38和NF-κB p65 m RNA含量。结果:(1)一般情况:与空白组比较,模型组大鼠在实验过程中出现性情暴躁,动作迟缓,口鼻分泌物增多,进食、饮水减少、体重减轻。调气止咳方各剂量组、地塞米松组和孟鲁司特组大鼠的进食、饮水及排便正常,体重增长与空白组相近。(2)HE染色:与空白组相比,模型组大鼠气道有明显炎性细胞浸润现象;与模型组相比,各治疗组气道慢性炎症均明显减轻;Masson染色:与空白组相比,模型组气道有大量胶原沉积,气管壁厚度也显著增加;相较于模型组,给药组气道胶原沉积和气管壁厚度增加情况均有不同程度的改善。(3)血清ELISA检测:与空白组比较,模型组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量明显升高(P<0.01);与模型组相比,各给药组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量相对降低(P<0.05);与地塞米松组相比,中药高剂量组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量相对降低,差异显著((49)<0.05);与孟鲁司特组相比,中药高剂量组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α下降,其中与TNF-α含量之间的差异具有统计学意义(P<0.01)。(4)Western Blot法检测:与空白组相比,模型组MAPK p-p38蛋白相对于p38的蛋白表达升高,NF-κB p-p65相对于p65的蛋白表达升高,P值有统计学意义(P<0.01);与模型组比,除孟鲁司特组和中药低剂量组MAPK p-p38蛋白相对于p38的蛋白表达降低不明显外,余给药组MAPK p-p38、NF-κB p-p65含量均明显降低(P<0.05),MAPK p-p38相对于p38的蛋白表达降低,NF-κB p-p65相对于p65的蛋白表达降低,均具有显著差异(P<0.01);与地塞米松组相比,中药高剂量组MAPK p-p38与p38的比值降低(P<0.01),NF-κB p-p65与p65比值的降低,但不具有统计学意义(P>0.05)。与孟鲁司特组相比,中药高剂量组MAPK p-p38与p38的比值降低(P<0.01),NF-κB p-p65与p65的比值降低(P<0.01)。(5)RT-PCR检测结果:⑴与空白组比较,其余各组MAPK p38、NF-κB p65 m RNA相对表达量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);⑵与CVA模型组相比,中药各剂量组、地塞米松组、孟鲁司特组MAPK p38、NF-κB p65 m RNA均有下降,其中中药低剂量组MAPK p38 m RNA与模型组之间差异无统计学意义(P>0.05),余各组差异均具有统计学意义(P<0.01);⑶与地塞米松组比较,中药高剂量组MAPK p38、NF-κB p65 m RNA表达水平与之差异不显著(P>0.05);⑷与孟鲁司特组比较,中药高剂量组NF-κB p65 m RNA表达水平与之差异不明显(P>0.05)。结论:(1)调气止咳方能够减轻CVA大鼠气道炎性细胞浸润情况,减少气道胶原蛋白沉积和气道壁厚度增加;(2)调气止咳方能调控血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平,减轻大鼠气道炎症;(3)调气止咳方可以下调NF-κB、MAPK信号通路中的MAPK p38、NF-κB p65 m RNA基因的相对表达量,调节NF-κB、MAPK通路相关蛋白MAPK p38、p-p38、NF-κB p65、p-p65的表达;(4)调气止咳方对CVA大鼠的气道慢性炎症情况及相关炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的干预作用可能是通过对NF-κB、MAPK信号通路的调控作用达到的。