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在全球范围内,胃癌是发病率较高的恶性肿瘤,而在我国部分地区,胃癌更是位居恶性肿瘤之首,其浸润和转移是一个多步骤、多阶段和多因素参与的复杂过程,是影响胃癌患者预后的主要因素。与张力蛋白同源、第10染色体丢失的磷酸酶(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome10 PTEN)是人类新发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,能通过脱磷酸化作用调控细胞内信号传导通路,从而抑制肿瘤细胞增殖、粘附、转移。间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)是间隙连接蛋白家族的主要成员,以依赖间隙连接GJ(Gap junction)的途径发挥抑癌作用。S期激酶相关蛋白(S phase kinase protein2 Skp2)是F—box蛋白家族的成员,它能特异性识别并促进某些调节G1期进程的关键性细胞周期调节物的降解,在许多肿瘤中表达升高。
目的:本研究检测PTEN、Cx43和Skp2在胃癌中的表达情况,探讨它们的表达与胃癌发生发展的关系以及它们之间蛋白表达的相互关系。
方法:1.研究对象:选择临床及病理资料齐全的存档胃腺癌蜡块标本83例,按各临床病理因素分组。另取正常胃粘膜标本20例作对照。2.主要试剂与器材:浓缩型鼠抗人PTEN单克隆抗体,浓缩型兔抗人Cx43蛋白多克隆抗体,浓缩型鼠抗人Skp2单克隆抗体其浓度分别为:1:75、1:400、1:100,pv9000试剂盒及dab显色试剂盒。免疫组织化学染色所需要的常规试剂与仪器。3.将蜡块切片HE染色,确定标本组织分化程度。采用PV9000免疫组化方法检测PTEN,Cx43,Skp2在胃癌及正常胃组织中的表达。以细胞内出现明显棕黄色颗粒为阳性细胞,按其占同类计数细胞的百分比、染色强度及部位计数三种蛋白质结果。所得数据采用X2检验和spearman相关分析作统计学分析,P<0.05为差异显著标准。
结果:1.在胃癌中,PTEN蛋白的表达在不同年龄、性别、肿瘤大小的胃癌组织中无显著性差异(P>0.05)。在按病理分期、组织分化类型、不同浸润深度及有无淋巴结转移方面分组统计分析显示PTEN蛋白的表达存在显著性差异(P<0.05)。2.在胃癌中,Cx43蛋白的表达在不同年龄、性别、及肿瘤大小胃癌组织中无显著性差异(P>0.05)。在按病理分期、组织分化类型、不同浸润深度的及有无淋巴结转移方面分组统计分析显示Cx43蛋白的表达存在显著性差异(P<0.05)。3.在胃癌中,与对Cx43蛋白表达的分析相类似:不同年龄、性别、肿瘤大小胃癌组织中Skp2蛋白表达也无显著性差异。在按病理分期、组织分化类型、不同浸润深度及有无淋巴结转移分组方面统计分析显示Skp2蛋白的表达存在显著性差异:Skp2蛋白的表达随着病理分期的增加而上调(p<0.05);
结论:1.在胃癌组织中,PTEN、Cx43低表达,而Skp2则高表达。2.在胃癌组织中PTEN、Cx43及Skp2的表达率与病理分期、组织分化类型、有无淋巴结转移、临床分期、肿瘤病理分化程度密切相关,提示他们在胃癌的发生发展和浸润转移过程中有抑制或促进作用。3.胃癌组织中Cx43与Skp2、PTEN与Skp2的表达呈负相关,Cx43与PTEN的表达呈正相关,提示他们在胃癌的发生发展和浸润转移过程中有相互制约或者相互促进作用。4.PTEN、Cx43及Skp2各自都可以作为胃癌生物学行为和预后判断的指标,且联合检测准确性更高。