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[背景与目的]乳腺癌是威胁我国女性健康的主要恶性肿瘤,发病率与死亡率居女性肿瘤之首,其中20%-25%的浸润性乳腺癌过表达HER2蛋白,导致相应的信号转导系统过度活化,细胞增殖失控,侵袭性更强,是乳腺癌预后不良的一项独立的危险因素。所以针对HER2的靶向治疗成为近年来研究的热点。曲妥珠单抗(trastuzumab,商品名：赫赛汀,herceptin)是通过基因工程方法,将非特异的人IgG稳定区与特异的鼠抗HER2抗原决定簇结合在一起设计的人源化单抗,能与HER2特异性结合。赫赛汀自1998年获美国FDA批准上市以来,目前已被获准用于术后辅助及晚期HER2阳性乳腺癌。对于早期乳腺癌患者,赫赛汀与化疗联合应用可明显改善无病生存和总生存。对于晚期乳腺癌患者,赫赛汀与化疗联用可明显提高有效率,延长至疾病进展时间和总生存。随着新的靶向药物的问世,赫赛汀与拉帕替尼、贝伐单抗、帕妥珠单抗、T-DM1、来那替尼等靶向药物联合治疗晚期乳腺癌的多项临床研究证实赫赛汀与这些药物联用可使患者获益。本研究选择赫赛汀与靶向端粒酶的反义寡核苷酸药物癌泰得,以蛋白靶点和基因靶点的双靶点联合应用为思路,探讨了靶向HER2的单克隆抗体药物赫赛汀(herceptin)与靶向端粒酶逆转录酶(hTERT) mRNA的反义核酸药物癌泰得(cantide)联合应用,对于HER2过表达细胞株BT474的体内、外作用,为靶向药物的联合应用提供研究思路及实验依据。[方法]选择HER2过表达乳腺癌细胞系BT474；1)MTT法测定赫赛汀与癌泰得两药单独应用与联合应用对HER2过表达细胞系BT474的生长抑制作用；2)应用间接免疫荧光法观察目的蛋白HER2和hTERT在BT474细胞中的分布及药物对两种蛋白亚细胞定位的影响；3)流式细胞仪测定两药单用及联用后细胞周期变化；4)Annexin/PI双染法检测各组细胞凋亡比率；5)BT474细胞接种裸鼠,对比两药单用与联用,裸鼠瘤重、瘤体积变化。[结果]1)MTT法观察到赫赛汀、癌泰得单用和联用均对BT474细胞有抑制作用,联用时抑制率增加,两药在低浓度联用时为协同作用,在高浓度联用时为相加作用；2)BT474细胞中同时表达HER2和hTERT蛋白,HER2主要分布于细胞膜表面,hTERT分布于细胞核,加入赫赛汀后,HER2出现了胞浆迁移,hTERT定位无明显变化；3)流式细胞仪检测到单独应用赫赛汀将BT474细胞阻滞于GO/G1期,单独应用癌泰得将BT474细胞阻滞于G2/M期,两药联用以GO/G1期阻滞明显；4)流式细胞仪检测到单独应用赫赛汀,细胞凋亡率为16.84%,单独应用癌泰得,凋亡率为16.38%,两药联用凋亡率为22.57%，以晚期凋亡为主；5)BT474细胞接种裸鼠,成瘤性良好,单独应用癌泰得抑瘤率为43.5%，单独应用赫赛汀抑瘤率为55.41%,两药联用抑瘤率为67.41%。[结论]1)体外研究提示,单独应用赫赛汀或癌泰得,对BT474细胞有抑制作用,抑制率与浓度呈线性相关；2)两药在低浓度联用具有协同作用,在高浓度联用具有相加作用,联用可提高BT474细胞的凋亡率；3)体内研究提示：单独应用赫赛汀或癌泰得,可抑制裸鼠肿瘤生长；4)两药联合应用,对裸鼠肿瘤抑制率较两药单独应用更高,为相加作用。