随着养驴规模化、集约化发展,繁殖效率的高低成为制约养殖效益的重要因素,通过早期妊娠诊断,减少空怀是提高繁殖效率的重要措施。目前驴的妊娠诊断主要依靠“直肠触诊法”,确诊时间约为配种后60 d,不仅妊检时间晚,延长空怀期,同时也大大增加了人畜共患病的传播风险。本研究通过孕马血清促性腺激素（Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG）免疫检测条件、配种后PMSG最佳检出时期和PMSG血清免疫学检测符合率验证三部分内容,建立了成熟的PMSG检测方法,为驴早期妊娠检测纸条的制备奠定基础。研究结果如下:建立PMSG免疫学检测方法。通过SDS-PAGE检测了PMSG抗原的纯度,Dot blot方法验证了能够与PMSG结合的抗体,采用Western Blot验证了PMSG与抗体以空间表位方式结合,并进一步通过ELISA方法建立PMSG浓度与吸光度值的酶标曲线,拟合方程为y=0.0045x+0.0202,R²=0.998;母驴妊娠后PMSG分泌规律。采集配种后第2、3、4、5、6、7和8周的母驴血清,使用ELISA酶联免疫方法测定血清PMSG含量。从第5周开始,可检测到血清PMSG,且含量逐步增加,50 d达到峰值80 IU·mL^-1,后续开始下降;临床验证。挑选15头配种母驴,并且直肠检查孕驴15头,利用本试验建立起来的血清免疫学检测方法检测配种5周后母驴血清,发现孕驴7头,未妊娠驴8头,孕驴阳性临床符合率为46.7%,检测配种6周后母驴血清,发现孕驴14头,未妊娠驴1头,孕驴阳性临床符合率为93.3%。检测配种7周后母驴血清,发现孕驴15头,未妊娠驴0头,孕驴阳性临床符合率为100%。空怀母驴阴性对照15头,血清免疫学检测方法检测为15头,阴性临床符合率为100%。综上,通过血清PMSG酶联免疫检测早期妊娠母驴的检测时期为配种5周后,最佳检测时期为配种后6或7周。