【摘 要】
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背景:检验仪器良好的分析性能是保证临床检验结果准确性的重要基础,能否向临床提供高质量的检验报告和信息,满足临床工作和患者的要求,得到临床医师和患者的信赖与认可,是实验室质量控制的核心问题。在目前临床研究中,定量实验的性能验证包括精密度、正确度及线性范围的验证等,缺乏对临床常用实验的实验分辨率的检测方法及相关数据的检测。我们建立了一种测量临床试验(生化试验、自动血液分析仪方法、免疫实验、化学实验和q
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背景:检验仪器良好的分析性能是保证临床检验结果准确性的重要基础,能否向临床提供高质量的检验报告和信息,满足临床工作和患者的要求,得到临床医师和患者的信赖与认可,是实验室质量控制的核心问题。在目前临床研究中,定量实验的性能验证包括精密度、正确度及线性范围的验证等,缺乏对临床常用实验的实验分辨率的检测方法及相关数据的检测。我们建立了一种测量临床试验(生化试验、自动血液分析仪方法、免疫实验、化学实验和q PCR)的实验分辨率的检测方法,以评价其分析性能,并将其应用于对新方法的评价,以检测其在实际应用中的效果。方法:1.用生化试验、自动血液分析仪方法、免疫实验、化学实验和q PCR分别对相应等比例浓度稀释样本进行检测,将检测结果与相对浓度进行相关性分析。2.当相关性分析结果的p值小于等于0.01时,结果为有效值。结果有效时的最小浓度梯度(如10%)被定义为实验分辨率。对于该方法,最小浓度梯度的数值越小,实验分辨率越高,分析性能越好。3.如果检测结果与相对浓度之间的拟合结果对于50%浓度梯度稀释系列样品的检测仍然有效,则实验分辨率为50%,表明是定性实验;如果检测结果与相对浓度的拟合结果对25%浓度梯度稀释系列样品的测量仍然有效,则实验分辨率为25%,为半定量实验;如果检测结果与相对浓度之间的拟合结果对于10%浓度梯度稀释系列样品的测量仍然有效,则实验分辨率为10%,表明是定量实验。4.在实验分辨率的基础上根据速率法建立标准曲线,检测ELISA实验的灵敏度。结果:1.常用生化指标的实验分辨率达到10%,有的甚至达到1%。对不同浓度梯度稀释样本生化结果的相关系数进行Pearson相关性计算可看出,25%、10%、1%浓度梯度等比稀释样本的检测结果无相关性。2.qPCR的实验分辨率为10%,而不是1%,灵敏度的高低与否并不能作为判断实验分辨率的依据,我们需要对实验分辨率进行实际检测。3.酶联免疫吸附实验(ELISA)实验和胶体金实验的分辨率为25%,而不是10%,自动免疫分析(化学发光免疫分析)的实验分辨率可以达到1%。4.气相色谱法和火焰原子吸收分光光度法的实验分辨率均达到1%,表明经典化学方法仍然是有效的测量方法。5.白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)、嗜酸性粒细胞(EOS)、血红蛋白(HB)、血小板(PLT)的实验分辨率达到10%,红细胞(RBC)的实验分辨率可达到1%,单核细胞检测的实验分辨率仅为25%;嗜碱性粒细胞检测的实验分辨率仅为50%。血液经浓缩处理后,嗜碱性粒细胞的实验分辨率可以提高至50%。6.应用实验分辨率对ELISA速率法的灵敏度进行检测,可以准确检测50%浓度梯度样本的分辨率,然而无法对25%浓度梯度样本进行检测,对原有的灵敏度检测方法改进不明显,需要设计新的方案继续改良检测方法才能进行实际应用。结论:1.本研究建立了一种测定临床实验实验分辨率的方法,为评估临床实验方法的可靠性提供了新的指标。2.对生化试验、自动血液分析仪方法、免疫实验、化学实验和q PCR的实验分辨率进行检测,大多数生化指标为定量实验,手工类免疫实验仅能半定量检测,自动免疫实验为定量实验,化学实验分辨率可达1%,能进行准确定量,q PCR实验为定量实验。实验分辨率的提出为评估临床实验方法的可靠性提供了新的指标。3.实验分辨率对酶联免疫速率法的灵敏度进行了检测,对实验分辨率进行了实际应用,虽然仍有一定的改进空间但可以有一定的应用价值。
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